藥物研發與質量控制藥物純度分析:檢測原料藥在紫外區的特征吸收峰(如阿司匹林在 229nm 的吸收),判斷是否含雜質。藥物代謝研究:監測藥物與酶反應過程中吸光度變化(如細胞色素 P450 酶在 450nm 的特征吸收),評估代謝速率。4. 環境與食品檢測污染物監測:檢測水中重金屬離子(如鐵離子與鄰菲羅啉顯色后在 510nm 的吸光度)、農藥殘留(如有機磷農藥的酶抑制法在 412nm 的吸光度)。食品品質評估:檢測牛奶中的蛋白質含量(280nm 吸光度)、食用油的過氧化值(通過硫氰酸鐵法在 500nm 的吸光度)。可用于判斷提取的 DNA 或 RNA 的產量,為后續實驗如基因克隆、PCR 等提供準確的起始濃度信息。江蘇國產微量分光光度計功能

微量分光光度計是一種用于測量極微量物質濃度的精密儀器。它的主要功能和特點可以歸納如下:測量物質濃度:微量分光光度計通過測量物質吸收特定波長的光線的量來確定物質的濃度。它利用物質對光的吸收特性,當光線通過待測樣品時,部分光線被樣品吸收,剩余的光線則透過樣品。通過測量透過樣品的光線的強度變化,可以計算出樣品的吸光度,進而根據吸光度與濃度的關系(如朗伯-比爾定律)確定物質的濃度。定量分析:在生物化學、制藥、環境監測等領域中,微量分光光度計常用于對微量化合物或生物分子的組分進行定量分析。通過測量樣品在特定波長下的吸光度,可以準確獲取樣品中各組分的濃度信息。結構分析:除了定量分析外,微量分光光度計還可以用于物質的結構分析。通過測量樣品在不同波長下的吸光度變化,可以了解樣品中各組分的吸收光譜特性,進而推斷出樣品的結構信息。全波長微量分光光度計功能完整的雙鏈 DNA 在 260nm 處有典型的吸收峰,若出現降解,則吸收峰會發生變化,在 230nm 處可能出現異常吸收。

微量分光光度計(也稱為超微量分光光度計)是實驗室常用的精密儀器,主要用于快速測定微量樣本(通常 1-2μL)的核酸(DNA/RNA)、蛋白質、細胞培養液等的濃度和純度,具有樣品用量少、檢測速度快、無需比色皿等特點。基于朗伯-比爾定律:當光線通過樣品時,特定波長的光被樣品中的物質吸收,吸光度與物質濃度成正比。儀器通過光纖探頭直接吸取微量樣品(1-2μL),在探頭間形成液柱,光源照射后檢測不同波長的吸光度(A值),進而計算濃度和純度。**檢測波長:核酸(DNA/RNA):260nm(核酸吸收峰)、280nm(蛋白質吸收峰,用于判斷純度,純DNA的A260/A280≈1.8,純RNA≈2.0)。蛋白質:280nm(芳香族氨基酸吸收)、230nm(鹽、去污劑等雜質吸收)。其他:如細胞密度(600nm,OD600)、染料標記樣品等,可通過自定義波長檢測。
純度評估的關鍵波長:280nm和230nm核酸樣品的純度需通過260nm與其他波長的吸光度比值判斷,**是排除蛋白質、有機溶劑等雜質的干擾:1.280nm:排除蛋白質污染蛋白質中的芳香族氨基酸(酪氨酸、色氨酸)在280nm有吸收峰,因此:比值A260/A280用于評估蛋白質污染程度:純雙鏈DNA的理想比值為1.8±0.1;純RNA的理想比值為2.0±0.1;若比值低于標準(如<1.6),說明樣品可能混有蛋白質(需考慮是否因苯酚/氯仿殘留導致,二者也會影響280nm吸光度)。2.230nm:排除鹽、有機溶劑或雜質污染鹽(如EDTA、NaCl)、有機溶劑(如苯酚、乙醇)、碳水化合物等雜質在230nm有較強吸收,因此:比值A260/A230用于評估這類雜質的污染:理想比值應**≥2.0**(部分標準為1.8-2.2);若比值過低(如<1.5),說明樣品可能殘留鹽、酚或多糖,會干擾定量準確性(如高鹽會導致A260假性升高)。體積小,易于操作:設備本身體積小,操作簡便,有些型號還配備了觸摸屏,便于用戶操作和數據輸出。

典型應用場景與檢測實例:生命科學研究核酸研究:檢測 DNA/RNA 濃度(260nm 吸光度)及純度(260/280nm 比值,純 DNA≈1.8,純 RNA≈2.0)。病毒核酸定量:如 RNA 提取液的 260nm 吸光度檢測,結合 RT-PCR 定量病毒載量。蛋白分析:Bradford 法 / BCA 法蛋白定量:檢測 562nm 或 540nm 吸光度,結合標準曲線計算蛋白濃度。抗體純度評估:通過 280nm(蛋白)與 260nm(核酸)吸光度比值判斷抗體樣本純度。醫學與臨床檢測血液生化指標檢測:檢測血清中葡萄糖(通過葡萄糖氧化酶反應在 505nm 的吸光度)、尿素氮(脲酶法在 540nm 的吸光度)等。病原體快速篩查:細菌內***檢測:利用鱟試劑反應在 405nm 的吸光度變化,定量內***濃度(如藥品生產中的熱原檢測)。光源發射光線,經過單色器后得到單一波長的光線,光線透過待測樣品,部分光線被吸收,剩余光線進入檢測器。熒光微量分光光度計品牌排行
通過光譜分析,它能檢測樣品質量,揭示成分分布與濃度,助力樣品純化。江蘇國產微量分光光度計功能
2. 代謝活性評估利用微生物代謝過程中輔酶(如 NADH)的吸光度變化(340nm),間接反映細胞活性。例如,在***敏感性測試中,藥物抑制代謝會導致 NADH 生成減少,吸光度變化速率降低。3. 核酸 / 蛋白定量雖然主要用于微生物濃度檢測,但分光光度計在 260nm(核酸)和 280nm(蛋白)的吸光度測量仍遵循朗伯 - 比爾定律,可用于評估微生物裂解液中的核酸 / 蛋白含量(如提取質粒后的純度分析)。局限性與誤差來源:非線性范圍:當微生物濃度過高(如 OD600>1.0)時,細胞間散射增強,吸光度與濃度的線性關系偏離,需稀釋樣本后測量。非細胞物質干擾:培養基中的顆粒雜質、細胞碎片會導致吸光度虛高,需通過離心、過濾或空白校正消除干擾。形態變化影響:微生物處于不同生長階段(如芽孢形成、菌絲分化)時,細胞形態改變可能導致吸光度與實際數量的線性關系偏移,需結合其他方法(如顯微鏡計數)校準。江蘇國產微量分光光度計功能