但該方法由于有放射性污染并且很難實現單細胞檢測而受到很大的限制，隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多，且需要使用BrdU抗體，影響因素較多，穩定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體，有時會和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續的點擊反應，無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高，是一種在BrdU法基礎上升級換代的新方法，將會逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學發光法(C0065、C0068)都是基于細胞活性的細胞增殖檢測方法，能檢測到細胞的總體增殖效果，但無法檢測到單個的增殖細胞。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢如何？北京正規EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

EdU細胞增殖方法簡單，方便，無需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標記，以檢測細胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用，東寰生物提供多種染料供選擇，覆蓋常用檢測通道，方便您輕松選擇適合的染料，比較大限度地擴展第三方染色的適用范圍，比較大限度地滿足您的檢測儀器要求，完全解決您的實驗難題。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點，更適合結合其他染料或蛋白標記（如P65抗體）等進行多重標記，從而在細胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細胞功能方面的研究天津提供EdU細胞增殖檢測試劑盒購買EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項。

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。

EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養基；(b)提前將2xEdU標記培養基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養基建議現用現配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時，棄培養基；注：1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態；2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。

搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ulTritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；染色反應液組分500ul1ml2ml5mlIX反應緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測混合液，以覆蓋細胞為宜，避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應液，加入300ulTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次，每次10分鐘；(f)棄細胞滲透液，用PBS洗兩次，每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液；(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液，室溫避光孵育20-30分鐘后，棄染色液；(c)每孔加入300ulPBS洗細胞兩次，去掉洗液。EdU細胞增殖檢測試劑盒運用再哪些領域？安徽口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒

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本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透，就可以使疊氮化物探針有效進入細胞并發生點擊反應，不會影響細胞形態，不會影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測，也不會影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測細胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測細胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進入細胞并與DNA上的BrdU結合，需要對雙鏈DNA進行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等)，這種變性可能會影響細胞形態，影響后續的免疫熒光和免疫組化檢測、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較參見圖2。北京正規EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商