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金山區如何使用疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2023-02-11

得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據大鼠體重選擇l型棒的直徑大小:當大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。在另一個具體實施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內不會對神經造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內,即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾,也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產生不良影響。哪里可以做動物模型?金山區如何使用疾病動物模型建模

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引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現要素:針對上述現有技術,本發明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發明根據“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發明是通過以下技術方案實現的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:將劑量為按體重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規購買得到,比如齊魯制藥公司生產的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。宿遷小鼠疾病動物模型建模很多自發性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。

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pcrmix:反應條件:pcr擴增產物的電泳鑒定結果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產物沒有這兩個擴增產物。(c)短鏈pcr反應,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產物,而野生型沒有。pcr體系:反應條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。

1、動物模型名稱:橄欖油聯合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環境:SPF級1、實驗方法:橄欖油聯合酒精誘導。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續正常飼養1個月。實驗結束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進行組織病理學檢查。上海東寰疾病動物模型建模。

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通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調節作用。附圖說明圖1為本發明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質粒載體的構建圖;圖2為本發明pirb基因敲入的小鼠模型的構建方法的流程圖;圖3為本發明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結果鑒定電泳圖;圖4為本發明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結果圖。歡迎致電咨詢疾病動物模型建模。閔行區非酒肝疾病動物模型建模

可根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。金山區如何使用疾病動物模型建模

具體實施方式下面結合附圖和具體實施方式對發明作進一步闡述。本發明構建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內。具體來說,構建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內含子設計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數據庫基因,采用crispr脫靶效應軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構;步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序對打靶質粒載體進行驗證,圖1為構建好的pirb基因打靶載體的示意圖。金山區如何使用疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司成立于2015-09-24,位于上海市嘉定區興賢路1180號5幢2樓206室,公司自成立以來通過規范化運營和高質量服務,贏得了客戶及社會的一致認可和好評。公司主要產品有原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型等,公司工程技術人員、行政管理人員、產品制造及售后服務人員均有多年行業經驗。并與上下游企業保持密切的合作關系。依托成熟的產品資源和渠道資源,向全國生產、銷售原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型產品,經過多年的沉淀和發展已經形成了科學的管理制度、豐富的產品類型。上海東寰生物科技有限公司本著先做人,后做事,誠信為本的態度,立志于為客戶提供原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型行業解決方案,節省客戶成本。歡迎新老客戶來電咨詢。

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