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閔行區非酒肝疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2022-11-07

建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義。現有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足,或與臨床實際病變部位有一定差距,如慢性坐骨神經結扎模型;或操作難度大,對動物損傷重,如自體髓核移植模型,選擇性神經根結扎模型。因此,急需一種新的操作簡單,重復率高,穩定且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術實現要素:為了建立一種操作簡單,穩定好且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型,本發明提供了一種大鼠慢性背根神經壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟:步驟一、麻醉大鼠;步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側或右側作縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌,暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔;步驟三、將壓迫元件插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。其中,步驟一具體為:腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后,將大鼠背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。在一個具體實施方式中,壓迫元件為l型棒;步驟三具體為:將2根l型棒的***端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。閔行區非酒肝疾病動物模型建模

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是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型~楊浦區泌尿疾病動物模型建模如何定義好的小鼠疾病模型?

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f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步驟c、采用限制性內切酶bamhi和avrii對dna進行切割;瓊脂糖凝膠電泳分離dna;步驟d、將dna轉到尼龍膜上;步驟e、探針變性后,與dna分子進行雜交,nbt/bcip化學顯色法顯色,拍照觀察。southern雜交結果如圖6所示,可以看到:6、8、9號pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步驟6、將f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子pirb基因敲入小鼠,即為本發明所述小鼠pirb基因敲入的動物模型。將本發明獲得的動物模型f2代純合子小鼠與同品系小鼠組織/細胞特異性cre表達的小鼠雜交,獲得f3代小鼠,可以實現在不同組織或者細胞類型中敲入pirb基因。對f3代小鼠進行基因型的鑒定:含有無(pirb-cwt)、一個(pirb-chet)或者兩個。

大鼠卵巢重量統計示意圖。圖6:動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動情前期,動情期,動情后期,動情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對卵泡形態的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實施方式下面結合實施例對本發明作進一步的說明。然而,本發明的范圍并不限于下述實施例。本領域的專業人員能夠理解,在不背離本發明的精神和范圍的前提下。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內不會對神經造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發病率低的缺點。

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來源:ZSCI基礎研究中如果加入動物實驗部分則使得研究更加趨于完善,投稿時中稿率也相應會增加。但將動物實驗做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動物模型的構建技術,把骨科、糖尿病相關的動物模型構建做了一個***的技術匯總,建議先碼后讀,文章內容有部分做了簡化,想看詳細講解可以在文末獲取課件!一、骨科相關動物模型1.骨關節炎1)骨關節炎模型構建方法(誘發性)-關節腔內手術法、關節腔注射法。2)模型評分標準①SafraninO染色與OARSI評分(PMID:31046827、30942801)②HE染色與OARSI評分(PMID:30609097)③SafraninO染色與Mankin評分(PMID:30609097)2.骨質疏松癥1)骨關節炎模型構建方法去趨法模型PMID:31037128實驗動物:小鼠方法:在戊巴比妥麻醉下進行雙側卵巢切除術以誘導骨質疏松癥,同時對照組小鼠*進行卵巢外置但未切除。2)模型檢測指標(PMID:31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相關指標檢測3.類風濕性關節炎類風濕性關節炎(RA)是一種慢性自身免疫性疾病狀態,其特征是滑膜增生,軟骨退化和脊椎關節的骨侵蝕4.強直性脊柱炎1)強直性脊柱炎模型構建方法2)模型檢測指標。避免了在人身上進行實驗所帶來的風險。宿遷咨詢疾病動物模型建模

便于研究者按實驗目的需要隨時采取各種樣品。閔行區非酒肝疾病動物模型建模

可以對本發明進行各種變化和修飾。本發明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現本發明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的,但是本發明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現有技術中已有的常規儀器、試劑、材料等,可通過正規商業途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現有技術中已有的常規實驗方法,檢測方法等。實施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規格為10mg的醫用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規格為10mg的醫用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中。閔行區非酒肝疾病動物模型建模

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