含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;5.增加接種細(xì)胞起始濃度;6.換用新的保種細(xì)胞;7.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。培養(yǎng)細(xì)胞生長不好可能原因細(xì)胞本身的狀態(tài)1.細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2.細(xì)胞的接...
流水線作業(yè),這樣能節(jié)省時(shí)間,并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請人,每個(gè)人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作,比如誰負(fù)責(zé)麻醉,誰負(fù)責(zé)取血液,誰負(fù)責(zé)取,誰負(fù)責(zé)拍照、誰負(fù)責(zé)儲存,都需要提前規(guī)劃交代清楚。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測如果是需要自己做的檢測,比如常見的WesternBlot、PC...
內(nèi)參的分子量與目標(biāo)蛋白質(zhì)不同,易于區(qū)分。一般建議分子量相差5KD以上。2、內(nèi)參選擇的步驟:先通過的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫Uniprot()查找目的蛋白的信息,包括細(xì)胞亞定位(用以選擇提取總蛋白、膜蛋白、胞質(zhì)蛋白、白還是細(xì)胞器蛋白),分子量(區(qū)分內(nèi)參蛋白的分子量)...
日久天長,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無限生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些...
實(shí)時(shí)熒光定量pCR技術(shù)服務(wù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)(DH1002)一.服務(wù)內(nèi)容1、引物設(shè)計(jì):客戶提供目的基因序列,我們可為客戶設(shè)計(jì)引物。2、RNA提取:從人或動(dòng)物細(xì)胞、組織等樣品中提取RNA樣品。3、逆轉(zhuǎn)錄:對樣品中RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA。4、實(shí)時(shí)熒...
肌動(dòng)蛋白):β-actin存在于不同類型的細(xì)胞中,分子量約為42kDa,主要位于細(xì)胞質(zhì)中,是一種結(jié)構(gòu)蛋白,參與細(xì)胞骨架的構(gòu)建和細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)等功能。(甘油醛-3-磷酸脫氫酶):參與細(xì)胞糖酵解途徑中的反應(yīng),分子量約為36kDa,位于細(xì)胞質(zhì)中,存在于不同類型的...
肌動(dòng)蛋白):β-actin存在于不同類型的細(xì)胞中,分子量約為42kDa,主要位于細(xì)胞質(zhì)中,是一種結(jié)構(gòu)蛋白,參與細(xì)胞骨架的構(gòu)建和細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)等功能。(甘油醛-3-磷酸脫氫酶):參與細(xì)胞糖酵解途徑中的反應(yīng),分子量約為36kDa,位于細(xì)胞質(zhì)中,存在于不同類型的...
3、培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度微生物生長需要一定的濕度條件。濕度對微生物生長的影響是通過影響微生物細(xì)胞內(nèi)水分活度進(jìn)而影響其新陳代謝來實(shí)現(xiàn)的。不同微生物的生長對濕度有一定的要求,一般來說,細(xì)菌為敏感,酵母和霉菌次之。降低濕度會使微生物的水分活度降低,從而減慢其生長速...
實(shí)時(shí)熒光定量pCR技術(shù)服務(wù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)(DH1002)一.服務(wù)內(nèi)容1、引物設(shè)計(jì):客戶提供目的基因序列,我們可為客戶設(shè)計(jì)引物。2、RNA提取:從人或動(dòng)物細(xì)胞、組織等樣品中提取RNA樣品。3、逆轉(zhuǎn)錄:對樣品中RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA。4、實(shí)時(shí)熒...
D-Efs1875元大鼠胃底平滑肌細(xì)胞SD-GFSMCs1875元大鼠胃竇平滑肌細(xì)胞SD-GASMCs1875元大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞SD-CSMCs1875元大鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞SD-CFCs1875元大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞SD-HPs2750元大鼠腎小管上皮細(xì)胞...
1、PCRPCR(PolymeraseChainReaction)即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是指在DNA聚合酶催化下,以母鏈DNA為模板,以特定引物為延伸起點(diǎn),體系中加入dNTP、Mg2+以及延伸因子、擴(kuò)增增強(qiáng)因子,通過變性、退火、延伸等步驟,體外復(fù)制出與母鏈...
基因敲除細(xì)胞構(gòu)建基因敲除細(xì)胞構(gòu)建服務(wù)(DH0009)一、服務(wù)介紹1、從靶點(diǎn)篩選到細(xì)胞株構(gòu)建一站式服務(wù)。2、采用慢病毒系統(tǒng)構(gòu)建,基因整合穩(wěn)定。3、保證干擾效率大于80%(以RT-PCR檢測靶基因mRNA表達(dá)結(jié)果為依據(jù))。4、根據(jù)您的需要可以提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的...
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準(zhǔn)備)。抗體的使用量通過預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn),原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品(盡量提供)。4、相關(guān)文獻(xiàn)(可選)。注:若要檢測磷酸化蛋白,請?jiān)?-3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行,因?yàn)殚L時(shí)...
并進(jìn)行無內(nèi)質(zhì)粒抽提。GAG質(zhì)粒和VSV質(zhì)粒同樣可以轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)菌DH5α中,并進(jìn)行無內(nèi)質(zhì)粒抽提。質(zhì)粒抽提后冷凍于-20℃保存。2、慢病毒包裝1)使用DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)6cm皿HEK293T至匯合度為70~80%。采用opti-MEM和Lipo30...
細(xì)胞內(nèi)吞檢測細(xì)胞內(nèi)吞檢測服務(wù)(DH0013)一、服務(wù)介紹1)無菌條件下,將DiI-LDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至25-50μg/ml。2)加入活細(xì)胞內(nèi),37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。3)孵育結(jié)束,吸去含有HumanDiI-LDL的培養(yǎng)基,并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。4...
1.分子雜交與印跡技術(shù)(1)探針是經(jīng)過特殊標(biāo)記,能與待測單鏈核酸分子互補(bǔ)結(jié)合的已知核酸片段(2)印跡是將電泳分離后的大分子轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上,以便雜交的技術(shù)(3)DNA印跡:Southernblotting,用于檢測基因組DNA(4)RNA印跡:No...
熒光試劑請避光保存。反應(yīng)緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁...
細(xì)胞鑒定服務(wù)細(xì)胞鑒定服務(wù)(DH0007)一、服務(wù)介紹為了后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功進(jìn)行,我們對分離培養(yǎng)的細(xì)胞做一個(gè)細(xì)胞鑒定實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞鑒定實(shí)驗(yàn)包括形態(tài)學(xué)鑒定、免疫組織細(xì)胞化學(xué)鑒定(免疫熒光化學(xué)鑒定)、流式細(xì)胞儀鑒定二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工...
一.細(xì)胞復(fù)蘇1、提前準(zhǔn)備完全培養(yǎng)基并預(yù)熱至37℃(可以放至在水浴或培養(yǎng)箱中進(jìn)行預(yù)熱,需要多少預(yù)熱多少,反復(fù)預(yù)熱會導(dǎo)致培養(yǎng)基失活);用清洗潔凈的燒杯或其他合適容器裝有適量超純水,然后放入37-38℃水浴鍋中預(yù)熱至37℃(至少需30min);把所需耗材和其...
大到動(dòng)物死亡原因分析,小到灌胃操作耗時(shí)多長時(shí)間。建議反復(fù)總結(jié)出每天實(shí)驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)。做任何一個(gè)操作之前,建議提前腦海中反復(fù)模擬,準(zhǔn)備好相關(guān)工具和試劑,避免臨用之際缺少藥的,影響實(shí)驗(yàn)操作節(jié)奏和個(gè)人心情。筆者曾經(jīng)灌胃操作的時(shí)候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了,只好重新回實(shí)驗(yàn)...
把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞飄起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入適量(消化前預(yù)估細(xì)胞的數(shù)量,1-2...
1、取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝血均可)或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。2、取一支無菌離心管,先加入試劑A,再加入試劑D,使兩者形成梯度界面(試劑A:試劑D的體積比為3:2,如稀釋后的血液樣本小于5ml...
然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。外泌體的抑制作用外泌體水平升高通常與不同類型的惡化相關(guān),一些研究人員希望能通過降低外泌體到正常水平來防止不良預(yù)后...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)(DH0002)一、服務(wù)介紹細(xì)胞轉(zhuǎn)染(Transfection)是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或控制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可以分為兩大類,一類為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染...
血管生成實(shí)驗(yàn)血管生成實(shí)驗(yàn)(DH0011)一、服務(wù)介紹應(yīng)用Matrigel模擬機(jī)體環(huán)境,上面接種**細(xì)胞,觀察血管生成情況。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期(工作日)DH0011-1血管生成咨詢咨詢?nèi)⒖蛻籼峁?.客戶需提供生長狀態(tài)良好...
他疾病,即使疾病完全相同的病人,因病人的年齡、性別、體質(zhì)、遺傳等各不相同,對疾病的發(fā)性發(fā)展均有影響。采用動(dòng)物來復(fù)制疾病模型,可以選擇相同品種、品系、性別、年齡、體重、活動(dòng)性、健康狀態(tài)、甚至遺傳和微生物等方面嚴(yán)加控制的各種等級的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,用單一的病因作用復(fù)制...
原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過組織剪切、消化或酶解...
動(dòng)物模型常用的HBV小鼠模型:可簡單分為5類:(1)轉(zhuǎn)基因小鼠,將HBV基因組片段直接轉(zhuǎn)入小鼠胚胎中,小鼠模型可終生表達(dá)HBV;(2)水動(dòng)力注射模型,將HBV質(zhì)粒DNA高壓注射到小鼠體內(nèi);(3)AAV載體轉(zhuǎn)染模型,通過腺相關(guān)病毒攜帶HBV基因組進(jìn)入小鼠的細(xì)胞中...
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因1.胰蛋白酶消化過度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解);4.細(xì)胞老化;5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污...
1.甲醛(HCOH)毒性級別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:免疫組化實(shí)驗(yàn)中,取材后的組織或細(xì)胞需立刻投于固定劑中,使組織和細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。防護(hù)攻略:甲醛(福爾馬林)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致劑(不...