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鎮江正規疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2021-11-26

    該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統和神經系統的功能以及下游的調節機制。本發明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構建方法。本發明所采用的第一種技術方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內,所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發明所采用的第二種技術方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟實施:步驟1、基于crispr/cas9技術構建針對c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有loxp位點打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。確定研究疾病目的了解影響疾病發生的內在與外在因素。鎮江正規疾病動物模型建模

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    其中可以看出手術側后爪的縮足閾值較手術前及對側后爪有***降低,且標準誤區間非常小。圖4是表1的數據通過曲線圖的方式展現。結果顯示:大鼠在術后***天即出現手術側后爪敏感,施加輕微的重量(4g左右)都會引起縮足表現,這說明其痛閾明顯降低,對輕微的刺激均呈現抬腳,舔舐后足等痛覺過敏表現。這種表現維持至術后至少28天。而對側后爪在術前和術后縮足閾值變化不大,基本保持在20-25g。實施例3、模型的應用采用實施例1中描述的方法對兩組大鼠均進行了造模,l型棒的材料選擇的是h62黃銅或聚乳酸等不受磁場干擾、置入體內不會對神經造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天應用重復經顱磁刺激(rtms)***大鼠,其中一組接受了真的磁刺激,為磁刺激組;另一組接受了假的磁刺激,為假刺激組。結果顯示,磁刺激組的大鼠縮足閾值較假刺激組明顯提高,如圖5所示。這表明磁刺激緩解了神經壓迫造成的疼痛,該模型可以用于磁刺激***的研究。以上詳細描述了本發明的較佳具體實施例。應當理解,本領域的普通技術無需創造性勞動就可以根據本發明的構思作出諸多修改和變化。因此。江蘇生殖疾病動物模型建模什么是疾病動物模型建模?

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    技術領域:本發明屬于遺傳學和生物技術領域,具體涉及pirb基因敲入的小鼠動物模型,還涉及上述小鼠動物模型的構建方法。背景技術:鼠源成對免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人類免疫球蛋白樣受體b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7號染色體近端,總大小為,編碼841個氨基酸,目前鑒定出15個外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個免疫球蛋白樣結構域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個疏水的跨膜段,三個免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個itims樣序列組成的胞內段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經常位于105kd處,因為pirb是糖蛋白。以往研究發現,pirb在免疫系統和中樞調節中均發揮重要作用。在免疫系統中,pirb在許多造血細胞都有表達,包括b細胞、肥大細胞、巨噬細胞、粒細胞和樹突細胞,但是在胸腺細胞、成熟的t細胞和自然殺傷細胞不表達。

    圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。

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1、動物模型名稱:固定制動致制動應激大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環境:SPF級 。1、實驗方法:采用固定制動方法。大鼠每天固定5~6小時進行制動應激,連續制動40天。2、檢測標準:模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢;曠場試驗的結果顯示,造模結束時與正常對照組比較,模型組大鼠的水平穿越格數、垂直運動次數、理毛時間均減少,**格停留時間、糞便粒數均增加;ELISA的結果顯示,造模結束時與正常對照組比較,模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發現及篩選。虹口區疾病動物模型建模供應商

實驗動物向小型化的發展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。鎮江正規疾病動物模型建模

1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環境:SPF級 1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測外周血紅細胞總數(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測外周血RBC總數及Hb含量。2、檢測標準:模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構建了失血性貧血動物模型造模。鎮江正規疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司致力于商務服務,是一家服務型的公司。公司業務分為原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型等,目前不斷進行創新和服務改進,為客戶提供良好的產品和服務。公司秉持誠信為本的經營理念,在商務服務深耕多年,以技術為先導,以自主產品為重點,發揮人才優勢,打造商務服務良好品牌。上海東寰生物立足于全國市場,依托強大的研發實力,融合前沿的技術理念,飛快響應客戶的變化需求。

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