通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的應用范圍。福建口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢

與BrdU方法相比,EdU檢測方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,更簡單、更靈敏、更快速、更準確,是細胞增殖檢測的比較好選擇。更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,反應單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細胞也能準確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征上海正規EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書有哪些領域需要使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?

該方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于各種細胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點。
具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應一抗:請您提供質量保證的一抗(或委托我公司準備)。抗體的使用量通過預實驗后進行確認,原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品(盡量提供)。4、相關文獻(可選)。注:若要檢測磷酸化蛋白,請在2-3個月內進行,因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結果1、預實驗顯色結果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預實驗采取3個一抗稀釋度,選取部分實驗樣本。2、正式實驗顯色結果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整實驗報告。六、服務項目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數量有關,蛋白數量增加相應的樣品量也要增加。2、每張膜樣品數量為1-8個,不足8個以8個收取。9-16個樣品為2張膜,17-24個樣品為3張膜;以此類推。舉例:7個樣品,1個目的蛋白,算1張膜;有9個樣品,1個目的蛋白,算2張膜;7個樣品,2個目的蛋白,算2張膜,有9個樣品,2個目的蛋白,算4張膜。注:以上為一般算法。如果客戶樣品數量需要按照組別等來進行上樣時,需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數。3、選擇部分樣品進行預實驗,參考目的蛋白一抗說明書進行3個稀釋度的預實驗。EdU細胞增殖檢測試劑盒的基本結構級應用。

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。江西哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
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可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發光法)進行細胞群落中DNA合成測定(BrdUbased)。優點是:實驗結果同增殖細胞數目緊密相關,可一步完成細胞的溫和固定和變性,操作方便穩定,不破壞細胞形態。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI(熒光法)或KitII(AP)可使用試劑盒提供的BrdU單抗,以及酶或熒光偶聯二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結合BrdU。福建口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢