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福建正規EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發布時間:2025-09-28

EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。EdU細胞增殖檢測試劑盒的基本結構級應用。福建正規EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經典的細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒,被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解(圖1B)。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度(圖2)。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒實測效果圖。,在細胞培養箱內孵育4小時,顯微鏡下可見大量結晶狀的深紫色產物formazan生成。B.不同數量HeLa細胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小時的效果圖(上圖)及深紫色產物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent),充分溶解后的效果圖(下圖)。福建哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理EdU細胞增殖檢測試劑盒運用再哪些領域?

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注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)孵育時間至少2小時,可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透1、每孔加入150μl細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進行細胞固定;2)如果使用其他的細胞固定劑建議用DEPC水來配置,避免RNA酶降解細胞內的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入300μlTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;EU染色1、通過用10:1去離子水稀釋10×反應緩沖液進行配制1×EU反應緩沖液;2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現用現配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現棕黃色,則需報廢或更換。

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家值得信賴?

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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?浙江如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒

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上海東寰活細胞能將四咪唑鹽(如MTT、XTT、WST-1)還原成有色的甲瓚或甲瓚鹽(Formazan),可通過分光光度計或酶標儀進行檢測。CellCountingKit–8(96992)和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被細胞內脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養基中,生成的甲臜量與活細胞數量成正比。基于CCK-8(WST-8)的試劑盒能高度準確地檢測細胞增殖,比MTT法及XTT法的靈敏度高5倍,能檢測更低的細胞數目。該試劑盒可適用于96孔板培養的貼壁或懸浮細胞。福建正規EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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