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來源: 發布時間:2025-09-26

建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!天津正規EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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避免反復凍融。如短時間內需多次重復使用,請于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養板或培養皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板,HK2貼壁細胞為例)細胞培養取對數生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養至正常狀態。EU標記1、將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標記培養基;2、提前將2×EU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養基孵育細胞2小時,棄培養基。天津正規EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好EdU細胞增殖檢測試劑盒可以去哪里購買?

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BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體,由于空間位阻,雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結合。法使用小分子標記的疊氮化物(Azide),無需DNA變性,操作更便捷,兼容性好,檢測結果更加穩定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法,本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA,所需時間縮短。經本試劑盒處理后,增殖的細胞呈棕色,可以用普通光學顯微鏡進行觀察。HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側一列);EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列);而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預處理0.5小時后,棕色染色減弱,說明DNA合成被抑制后,EdU的摻入被抑制(右側一列)。

傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。上海東寰告訴您使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的便捷性。

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細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。通常根據平均DNA含量或細胞代謝參數進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數目和活細胞數目,或者測定出單個細胞內的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。經過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經歷的傳代數目。上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒值得信賴?北京EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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現在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。天津正規EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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