免疫熒光技術(shù)服務(wù)免疫熒光技術(shù)服務(wù)（DH0014）一、服務(wù)介紹免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，標(biāo)記的抗原或標(biāo)記的抗體與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，測(cè)定復(fù)合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)稱為免疫熒光素技術(shù)。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分直接法、夾心法、間接法和補(bǔ)體法。二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)價(jià)格服務(wù)周期（工作日）DH0014-01免疫熒光單標(biāo)記檢測(cè)咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標(biāo)記檢測(cè)咨詢咨詢?nèi)⒖蛻籼峁?、細(xì)胞株或細(xì)胞爬片。注：細(xì)胞爬片不宜太密；2、熒光檢測(cè)所用的抗體3、實(shí)驗(yàn)前，客戶需告知具體的細(xì)胞處理方式及詳細(xì)要求。注：若有特殊處理的樣品，請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料（具有保密性的材料除外）。四、服務(wù)流程免疫熒光單標(biāo)記方法免疫熒光單標(biāo)記是指只標(biāo)記一種蛋白質(zhì)分子，方法比較簡(jiǎn)單，只要按照染色步驟去做，通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇，固定液選擇的合適與否，可能會(huì)直接影響染色結(jié)果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a,培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達(dá)到60%-70%的細(xì)胞。b,一抗、FITC或TRITC標(biāo)記的二抗。c。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒，有哪些好處值得選擇？湖南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書

保存條件：4℃或-20℃保存，MTT需避光保存，一年有效；MTT配制成溶液后需-20℃避光保存；Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項(xiàng)：由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固，使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。湖南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒能給人們帶來便利嗎？

搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ulTritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；染色反應(yīng)液組分500ul1ml2ml5mlIX反應(yīng)緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測(cè)混合液，以覆蓋細(xì)胞為宜，避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應(yīng)液，加入300ulTritonX-100細(xì)胞滲透液清洗2-3次，每次10分鐘；(f)棄細(xì)胞滲透液，用PBS洗兩次，每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進(jìn)行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液；(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液，室溫避光孵育20-30分鐘后，棄染色液；(c)每孔加入300ulPBS洗細(xì)胞兩次，去掉洗液。

EdU-488細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一種利用核苷滲入法對(duì)細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡(jiǎn)單、高靈敏檢測(cè)的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)(圖1)。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測(cè)熒光信號(hào)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測(cè)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)廠家。

上海東寰活細(xì)胞能將四咪唑鹽（如MTT、XTT、WST-1）還原成有色的甲瓚或甲瓚鹽（Formazan），可通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。CellCountingKit–8（96992）和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。基于CCK-8（WST-8）的試劑盒能高度準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)胞增殖，比MTT法及XTT法的靈敏度高5倍，能檢測(cè)更低的細(xì)胞數(shù)目。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒在社會(huì)上的重要性。湖南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書

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與BrdU方法相比，EdU檢測(cè)方法無需DNA變性，無需抗原修復(fù)，無需抗原抗體反應(yīng)，更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確，是細(xì)胞增殖檢測(cè)的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完整；更簡(jiǎn)單--無需抗原抗體反應(yīng)，基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法，簡(jiǎn)單高效，反應(yīng)單需要幾分鐘；更靈敏--無需抗體，檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴(kuò)散，即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)；更快速--無需過夜，省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟，完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí)；更兼容--對(duì)樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征湖南哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書