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湖南提供EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

來源: 發(fā)布時間:2025-09-16

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替T滲入正在復制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應檢測DNA復制活性,通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。上海東寰告訴您什么是EdU細胞增殖檢測試劑盒?湖南提供EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

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搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應液組分500ul1ml2ml5mlIX反應緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測混合液,以覆蓋細胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應液,加入300ulTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;(f)棄細胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗細胞兩次,去掉洗液。河北正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?

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EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進行嚴格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行。

該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究EdU細胞增殖檢測試劑盒應用再哪些地方?

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本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組份,同時提供了藍色細胞核染料Hoechst33342,可以用來復染所有細胞核,也可用于細胞周期分析。使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-ContentScreening,HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細胞(每孔500μl的Click反應液)、96孔板培養(yǎng)的細胞(每孔50μl的Click反應液)、每管細胞數(shù)量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應液)EdU細胞增殖檢測試劑盒可以去哪里購買?北京品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒

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避免反復凍融。如短時間內(nèi)需多次重復使用,請于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板,HK2貼壁細胞為例)細胞培養(yǎng)取對數(shù)生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標記1、將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標記培養(yǎng)基;2、提前將2×EU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基。湖南提供EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

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