注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)孵育時間至少2小時,可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透1、每孔加入150μl細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進行細胞固定;2)如果使用其他的細胞固定劑建議用DEPC水來配置,避免RNA酶降解細胞內的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入300μlTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;EU染色1、通過用10:1去離子水稀釋10×反應緩沖液進行配制1×EU反應緩沖液;2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現用現配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現棕黃色,則需報廢或更換。上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢。湖南品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

EdU-488細胞增殖檢測試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488),是一種利用核苷滲入法對細胞增殖情況進行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為:試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物,EdU可以在在細胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction)(圖1)。通過點擊反應,新合成的DNA會被綠色熒光標記,然后通過檢測熒光信號實現細胞增殖的檢測。河南EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢如何?

EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。
為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,更適合結合其他染料或蛋白標記(如P65抗體)等進行多重標記,從而在細胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細胞功能方面的研究。有哪些領域需要使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?

免疫熒光技術服務免疫熒光技術服務(DH0014)一、服務介紹免疫熒光技術(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進行標記,標記的抗原或標記的抗體與相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術稱為免疫熒光素技術。免疫熒光細胞化學分直接法、夾心法、間接法和補體法。二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期(工作日)DH0014-01免疫熒光單標記檢測咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標記檢測咨詢咨詢三、客戶提供1、細胞株或細胞爬片。注:細胞爬片不宜太密;2、熒光檢測所用的抗體3、實驗前,客戶需告知具體的細胞處理方式及詳細要求。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關材料(具有保密性的材料除外)。四、服務流程免疫熒光單標記方法免疫熒光單標記是指只標記一種蛋白質分子,方法比較簡單,只要按照染色步驟去做,通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇,固定液選擇的合適與否,可能會直接影響染色結果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a,培養在蓋玻片或玻璃培養皿中融合程度達到60%-70%的細胞。b,一抗、FITC或TRITC標記的二抗。c。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!福建品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好
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熒光試劑請避光保存。反應緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。實驗步驟(以24孔板,HK2貼壁細胞為例)EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。湖南品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒公司