熒光試劑請避光保存。反應緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。實驗步驟(以24孔板,HK2貼壁細胞為例)EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發揮重要作用?上海東寰告訴您。河北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經典的細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒,被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解(圖1B)。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度(圖2)。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒實測效果圖。,在細胞培養箱內孵育4小時,顯微鏡下可見大量結晶狀的深紫色產物formazan生成。B.不同數量HeLa細胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小時的效果圖(上圖)及深紫色產物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent),充分溶解后的效果圖(下圖)。河南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒價格EdU細胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。

上海東寰生物科技有限公司細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。
EdU細胞增殖檢測試劑盒更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,反應單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細胞也能準確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征EdU細胞增殖檢測試劑盒價格。

4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃預冷20min)。d,封閉液。e,/LPBS緩沖液。2、染色方法a,取出培養有細胞的蓋玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛試問固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗兩次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室溫封閉30min-1h。e.去封閉液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃過夜。抗體以mo/LPBS稀釋(理想的抗體濃度需經試驗而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用濾紙吸干。(PBS配制)封片。j.免疫熒光顯微鏡下觀察,或于4℃避光保存。免疫熒光雙標記方法免疫熒光的雙標記是指同時標記細胞內兩種蛋白質分子,當懷疑某種配體與已知受體結合后可用此方法加以證明。此方法稍微復雜一些,應注意所用的一抗是來自不同種屬動物的兩種特異性抗體(例如:A抗體為多克隆抗體,來自家兔;B抗體為單克隆抗體,來自小鼠)。其次,兩種二抗所帶熒光素的發射光不應重疊,且盡量遠離,通常可以選擇FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5,或Cy3和Cy5等來組合。通常情況下,染色時兩種一抗可以同時孵育,然后可以同時孵育兩種二抗。但當染色結果一種顏色非常弱,而另一種顏色比較強時,應考慮先孵育顏色較弱的二抗。EdU細胞增殖檢測試劑盒的結構如何組成?河北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒價格
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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。河北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒價格