IgA腎病小鼠模型一、目的建立IgA腎病小鼠模型,并觀察模型的生化及病理指標特點。二、試劑耗材1、酸化水:鹽酸調滅菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:生理鹽水配制;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,滅菌水配制;三、方法:小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持續8周;2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持續8周;3、分別于第6、8周以()尾靜脈注射LPS,1次/周;4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細胞;5、每日觀察精神、飲食、大小便,第9周處死,取血和腎、肝做相應檢查;6、取尿液后2000r/min離心10min,取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值,鏡下觀察尿沉渣中有無紅細胞。利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進行實驗的人類疾病的研究。無錫成瘤疾病動物模型建模

麻醉小鼠,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管,將1mL注射器經兩氣管軟骨環間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力,則注入博萊霉素5mg/kg/L(對照組注入等量的生理鹽水)。手術完畢后迅速將動物直立、旋轉,使藥液在肺內分布均勻,動物清醒后常規飼養。4.2模型鑒定及后續檢測:肺纖維化模型發展時間:給藥后第7天肺組織大多呈重度肺泡炎改變,肺泡腔及肺間質內有大量中性粒細胞浸潤,部分肺泡腔破壞或消失,肺間隔內成纖維細胞和增生,與正常肺組織對比差別明顯;給藥后第14天,肺纖維化開始形成。巨噬細胞、中性粒細胞等炎性細胞明顯減少,成纖維細胞增多,肺泡間隔明顯增厚,有膠原沉積。給藥后第28天,多數小鼠發生彌漫性肺間質纖維化,肺間質被膠原纖維和成纖維細胞替代,肺泡壁破壞,肺大泡形成,但仍可見炎性細胞浸潤。虹口區疾病動物模型建模價格動物疾病模型廣泛應用于疾病機制研究。

圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。
ng)=×片段堿基對數(單片段);適片段用量(ng)=×片段堿基對數(多片段)。注1:單片段重組反應,若單個插入片段的長度大于載體,則應將載體與插入片段的計算公式互換;注2:單片段重組反應,若單個插入片段的長度小于200bp,則插入片段應使用5倍的用量;注3:多片段重組反應,各個插入片段的用量應不少于10ng,使用上述公式計算適使用量低于此值時,直接使用10ng;注4:若按上述公式計算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng,建議按50ng或200ng用量使用;注5:線性化載體過長,插入片段過長或片段數過多,克隆陽性率均會降低。2、體系反應;1、配制完成后,用移液器輕輕吸打混勻各組分,避免產生氣泡,切勿渦旋;2、將反應體系置于50℃,反應5~60min。3、將反應液離心管置于冰上冷卻,之后進行轉化或者儲存于-20℃注1:推薦使用PCR儀等溫控的儀器進行反應,反應時間不足或太長克隆效率均會降低;注2:插入1~2個片段時,推薦反應時間為5~1min;插入3~5個片段時,推薦反應時間為15~30min;注3:當載體骨架在10kb以上或插入片段總長在4kb以上時,推薦延長反應時間至30~60min;注4:建議在50℃反應完成后進行瞬時離心,將反應液收集至管底。注5:-20℃儲存的重組產物。查閱已有的相關小鼠模型綜述文獻。

2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片):3mg組動物死亡時間早,無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段,動情前期:撇圓形有核上皮細胞占絕大多數,白細胞和角化上皮細胞很少(圖a)。動情期:角化上皮細胞占多大多數,由散在增至集白細胞和有核上皮細胞很少(圖b)。動情后期:片狀角化上皮細胞,有核上皮細胞和白細胞3種都有,無太大差異(圖c)。動情間期:白細胞占絕大多數,有核上皮細胞和角化上皮細胞很少(圖d)。表6⑤病理結果:如圖7所示可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發病率低的缺點。嘉定區疾病動物模型建模說明書
可以簡化實驗操作和樣品收集。無錫成瘤疾病動物模型建模
誘發性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細胞遺傳特性異常而呈現出異常生長和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學性、物理性及生物性致*物,而化學性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達一千余種,用于誘發實驗性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實驗工作中應根據需要選用適當致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或實驗條件。基本原理:利用外源性致*物引起細胞遺傳特性改變,從而出現異常生長和高增殖活性細胞形成**。外源性致*物主要有化學性、物理性(如放射性物質)及生物性(如誘發動物**的病毒),其中以化學性致*物**為常用無錫成瘤疾病動物模型建模