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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-04-13

EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒應(yīng)用再哪些地方?上海品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒穩(wěn)定:適用于對(duì)細(xì)胞增殖狀況的連續(xù)觀察●經(jīng)濟(jì):無(wú)需裂解細(xì)胞,細(xì)胞可繼續(xù)培養(yǎng)或用于其他實(shí)驗(yàn)●可靠:文獻(xiàn)引用率高,Pubmed有上千篇文獻(xiàn)的引用AlamarBlue®的應(yīng)用●監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖狀態(tài)、研究細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡●監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)因子活性,評(píng)估生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響●物尤其是藥物的開(kāi)發(fā)●環(huán)境污染物質(zhì)的評(píng)估,細(xì)胞毒分析●效價(jià)評(píng)估細(xì)胞增殖過(guò)程中,細(xì)胞體內(nèi)的環(huán)境由氧化環(huán)境變化成還原環(huán)境,呼吸鏈中的NADPH/NADP,FADH/FAD,FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin(刃天青)是一種無(wú)毒、可透膜的藍(lán)色染料,有微弱的熒光性湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些?

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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性,就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響,因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí),然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。

上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問(wèn)題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn):安全—–不使用[3H]thymidine,無(wú)放射性污染。簡(jiǎn)單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測(cè)。無(wú)需DNA變性和孵育抗體。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)的用途有哪些?上海東寰告訴您。

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EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用?湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒在社會(huì)上的重要性。上海品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過(guò)基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過(guò)夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確上海品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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