另外pirb在髓細胞和b細胞的表達隨細胞分化增加。在免疫系統，pirb作為主要組織相容性復合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex，mhc1)的受體，參與免疫調節，包括中性粒細胞和巨噬細胞整合素通路、細胞毒性t淋巴細胞、b淋巴細胞和體液—細胞免疫應答等。pirb的前兩個細胞外免疫球蛋白結構域(d1-d2)介導mhci和pirb的結合。在系統(centralnervoussystem，cns)，pirb在許多腦區包括皮層、海馬、小腦和嗅球都有表達，但在成年脊髓不表達。在細胞層面，pirb不僅表達于神經元，也表達于星形膠質細胞。在許多病理條件下，如腦外傷、中風和cns，pirb的mrna和蛋白表達水平增加。疾病動物模型建模廠家。南通肺病疾病動物模型建模

ng）=×片段堿基對數（單片段）；適片段用量（ng）=×片段堿基對數（多片段）。注1：單片段重組反應，若單個插入片段的長度大于載體，則應將載體與插入片段的計算公式互換；注2：單片段重組反應，若單個插入片段的長度小于200bp，則插入片段應使用5倍的用量；注3：多片段重組反應，各個插入片段的用量應不少于10ng，使用上述公式計算適使用量低于此值時，直接使用10ng；注4：若按上述公式計算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng，建議按50ng或200ng用量使用；注5：線性化載體過長，插入片段過長或片段數過多，克隆陽性率均會降低。2、體系反應；1、配制完成后，用移液器輕輕吸打混勻各組分，避免產生氣泡，切勿渦旋；2、將反應體系置于50℃，反應5~60min。3、將反應液離心管置于冰上冷卻，之后進行轉化或者儲存于-20℃注1：推薦使用PCR儀等溫控的儀器進行反應，反應時間不足或太長克隆效率均會降低；注2：插入1~2個片段時，推薦反應時間為5~1min；插入3~5個片段時，推薦反應時間為15~30min；注3：當載體骨架在10kb以上或插入片段總長在4kb以上時，推薦延長反應時間至30~60min；注4：建議在50℃反應完成后進行瞬時離心，將反應液收集至管底。注5：-20℃儲存的重組產物。正規疾病動物模型建模公司可以簡化實驗操作和樣品收集。

pirb在軸突生長錐表達，位于富含肌動蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中，在神經元突起的表達呈點狀分布。文獻表明，pirb表達隨年齡增加，特別是在老齡認知損傷的小鼠海馬中，pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對海馬長時程增強的破壞作用需要pirb的參與，在ad轉基因模型中，pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失，而且介導幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們，pirb參與突觸可塑性，抑制pirb可能對ad起到***效應。但是在cns，pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題，我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點，為研究pirb在免疫系統或者神經系統的作用和機制提供了很好的工具。技術實現要素：本發明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。

技術領域：本發明屬于遺傳學和生物技術領域，具體涉及pirb基因敲入的小鼠動物模型，還涉及上述小鼠動物模型的構建方法。背景技術：鼠源成對免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb，pirb)，是人類免疫球蛋白樣受體b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2，lilrb2)的同源基因，pirb基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的7號染色體近端，總大小為，編碼841個氨基酸，目前鑒定出15個外顯子，外顯子1起始密碼為atg，外顯子15的終止密碼子是tga(轉錄本：)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白，包含由六個免疫球蛋白樣結構域(domain，d)組成(d1-d6)的胞外段，一個疏水的跨膜段，三個免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs，itims)和一個itims樣序列組成的胞內段。理論上講，pirb的分子量約為92kd，但是western-blot分析中，pirb經常位于105kd處，因為pirb是糖蛋白。以往研究發現，pirb在免疫系統和中樞調節中均發揮重要作用。在免疫系統中，pirb在許多造血細胞都有表達，包括b細胞、肥大細胞、巨噬細胞、粒細胞和樹突細胞，但是在胸腺細胞、成熟的t細胞和自然殺傷細胞不表達。明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。

在cns，pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題，我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點，為研究pirb在免疫系統或者神經系統的作用和機制提供了很好的工具。技術實現要素：本發明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。可以克服人類某些疾病潛伏期長，病程長和發病率低的缺點。淮安咨詢疾病動物模型建模

通過小鼠疾病模型的構建有助于我們深入揭示潛在致病基因作用機制。南通肺病疾病動物模型建模

可以嚴格控制實驗條件，增強實驗材料的可比性一般說來，臨床上很多疾病是十分復雜的，各種因素均起作用，患有心臟病的病人，可能同時又患有肺臟疾病或腎臟疾病等其他疾病，即使疾病完全相同的病人，因病人的年齡、性別、體質、遺傳等各不相同，對疾病的發性發展均有影響。采用動物來復制疾病模型，可以選擇相同品種、品系、性別、年齡、體重、活動性、健康狀態、甚至遺傳和微生物等方面嚴加控制的各種等級的標準實驗動物，用單一的病因作用復制成各種疾病。溫度、濕度、光照、噪音、飼料等實驗條件也可以嚴格控制。南通肺病疾病動物模型建模