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嘉定區疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2021-10-25

1、動物模型名稱:角膜環鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:1.8~2.5kg6、實驗動物環境:SPF級。1、實驗方法:角膜環鉆致兔角膜機械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯合肌肉注射速眠新Ⅱ進行兔麻醉。環鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒,以保持結膜清潔。開瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環鉆分別在兔眼角膜上作環切,并滴入2滴氯霉素眼藥水潤洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細眼剪小心去掉角膜損傷區域上皮,術畢,滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進行實驗的人類疾病的研究。嘉定區疾病動物模型建模

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    另外pirb在髓細胞和b細胞的表達隨細胞分化和***增加。在免疫系統,pirb作為主要組織相容性復合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex,mhc1)的受體,***參與免疫調節,包括中性粒細胞和巨噬細胞整合素通路、細胞毒性t淋巴細胞***、b淋巴細胞***和體液—細胞免疫應答等。pirb的前兩個細胞外免疫球蛋白結構域(d1-d2)介導mhci和pirb的結合。在***系統(centralnervoussystem,cns),pirb在許多腦區包括皮層、海馬、小腦和嗅球都有表達,但在成年脊髓不表達。在細胞層面,pirb不僅表達于神經元,也表達于星形膠質細胞。在許多病理條件下,如腦外傷、中風和cns***,pirb的mrna和蛋白表達水平***增加。在cns,pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體,參與神經元突起芽發和生長錐塌陷,抑制神經元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細胞外免疫球蛋白結構域(d3-d6)介導了pirb與nogoa的結合。近年來關于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)研究還發現,pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體,親和力達到納摩爾水平。pirb的前兩個細胞外免疫球蛋白結構域(d1-d2)介導了aβ42寡聚體和pirb的相互作用,導致絲切蛋白(cofilin)信號通路****組織化學染色結果發現。南京成瘤疾病動物模型建模小鼠疾病建模請找上海東寰。

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    圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。

1、動物模型名稱:卵清蛋白聯合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實驗動物種屬:豚鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:7~8周齡5、實驗動物體重:250~350g6、實驗動物環境:SPF級。1、實驗方法:卵清蛋白聯合氫氧化鋁誘導。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白(OVA)+30mg氫氧化鋁(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只,豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中,給藥過程中對盆內通O2。2、檢測標準:使用OVA噴霧激發后癥狀觀察,豚鼠出現不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀,表明成功構建了豚鼠***模型。可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性。

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1、動物模型名稱:FSH聯合HCG致超排懷孕小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:3~4周齡5、實驗動物體重:16~18g6、實驗動物環境:SPF級 1、實驗方法:注射用重組人促卵泡***(FSH)聯合注射絨促性素(HCG)誘導。對雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG當天下午約16:00~17:00按雌雄鼠1:1合籠。次日早上檢查雌鼠陰栓情況。2、檢測標準:合籠后次日雌鼠檢查出現陰栓,表明成功構建了超排懷孕小鼠模型。明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。黃浦區疾病動物模型建模公司

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    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡,平均體重20g),46h后注射hcg,與雄性小鼠合籠交配,次日取受精卵進行顯微注射,將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內,產出小鼠,即f0代小鼠。上述步驟中grna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl,cas9蛋白購自newenglandbiolabs,貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr擴增產物測序,鑒定是否為嵌合體。本發明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應的擴增產物大小為,primers2對應的擴增產物為。用于f0代小鼠測序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。嘉定區疾病動物模型建模

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