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來源: 發(fā)布時間:2024-02-18

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Jurkat細胞只用EdU標記(左列),或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時后染色,然后通過流式細胞儀進行檢測。從流式結果圖中可以看出,EdU標記的細胞有較高比例的綠色熒光陽性細胞,呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強染色)的兩個峰,分別對應于未增殖細胞和增殖細胞。經過Hydroxyurea處理的細胞,綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失,剩下一個綠色熒光陰性的峰。Hela細胞只用EdU標記(左列),或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時后染色(步驟染Hoechst,方便觀察增殖細胞比例),然后通過熒光顯微鏡進行檢測。鏡下可見,*EdU標記的細胞有一部分染上綠色熒光的增殖細胞,未增殖細胞的細胞核呈藍色單染。河北正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?

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保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項:由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內水源的地方,以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會凝固,使用前請室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色,需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

    蛋白抽提/WesternBlotting技術服務WesternBlotting技術服務(DH1004)一.服務內容1、蛋白提取:從人或動物細胞、組織,細胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對樣品中蛋白進行半定量分析。3、WesternBlot檢測(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內參檢測(所有內參抗體均不收取費用)。5、預實驗及正式實驗服務。二.樣品要求1、細胞>1×10^7;組織>30mg;細菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽性表達樣品(純蛋白、有陽性表達的細胞或組織、商品化的陽性對照產品等)作為陽性對照。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關材料(具有保密性的材料除外)。三.收費標準服務項目免疫學檢測服務內容周期產物/報告價格(元)DH1004-01樣品準備總蛋白提取、定量、質控3天總蛋白質控報告100元/樣DH1004-02免疫印跡(WB)WB預實驗,質控WB體系5-10天完整實驗報告1000元/膜WB檢測正式實驗10-15天完整實驗報告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關的必要資料。EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項。

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羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑,經過10mM羥基脲提0min處理的細胞,綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失,因此常被用作EdU實驗的陰性對照。配制好的Click-iTAdditiveSolution請根據(jù)每次用量適當分裝后-20℃保存,避免反復凍融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物質析出為正?,F(xiàn)象,請上下顛倒幾次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色,則說明有效成分降解,不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細胞的細胞懸液,以及其他含多種細胞類型的混合細胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細胞的同時,維持白細胞的光散射特性。本試劑盒做動物實驗時可能需要更多的EdU,請根據(jù)實驗需求用合適稀釋液稀釋后使用??诒玫腅dU細胞增殖檢測試劑盒公司

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