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山東如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

來源: 發(fā)布時間:2024-01-30

現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度EdU細胞增殖檢測試劑盒價格。山東如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

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試劑盒以外自備試劑和儀器:●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標儀使用方法:使用注意事項:●接種時注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉淀下來,導致每孔中的細胞數(shù)量不等,可以每接種幾個孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā),為了減少誤差,建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基,而不作為指標檢測孔。●培養(yǎng)時間根據(jù)細胞種類的不同和每孔內(nèi)細胞數(shù)量的多少而異。●用水或乙酸洗細胞時充滿孔后保持一會倒掉即可,也可以用排或洗板機。●OD值在1-2之間較好。以96孔板為例:1.取出培養(yǎng)好待測的96孔板。2.在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細胞加100μl固定液),靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液;懸浮細胞必須直接加入固定液,輕加在培養(yǎng)液面,靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時,可使懸浮細胞固定在培養(yǎng)孔底部)。湖北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。

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該方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于各種細胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內(nèi)抗原識別位點。

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結果,而且小分子化學反應檢測方法反應快,效率高,反應時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準確。使用EdU細胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處?

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細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的應用范圍。河南提供EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

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EdU-488細胞增殖檢測試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488),是一種利用核苷滲入法對細胞增殖情況進行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為:試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物,EdU可以在在細胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction)(圖1)。通過點擊反應,新合成的DNA會被綠色熒光標記,然后通過檢測熒光信號實現(xiàn)細胞增殖的檢測。山東如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

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