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福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

來源: 發布時間:2024-01-19

EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。上海東寰告訴您如何正確使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司EdU細胞增殖檢測試劑盒價格。

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傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性,抗原修復,抗原抗體過夜孵育,操作步驟復雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大,嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結合,必須先進行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但變性的程度可能導致錯誤結果。如果變性不充分,會導致BrdU難以暴露,無法檢測,而且變性過程從邊緣向中間滲透,會導致細胞核DNA的變性不均勻,邊緣模糊不清。如果變性過分,則會導致DNA斷裂,甚至降解,導致核染不均一。另外,不同抗體試劑公司的抗體質量不一致,造成難以確保實驗重復性,且容易產生假陽性結果。

細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經歷的傳代數目。通常根據平均DNA含量或細胞代謝參數進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數目和活細胞數目,或者測定出單個細胞內的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。EdU細胞增殖檢測試劑盒的結構如何組成?

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    避免反復凍融。如短時間內需多次重復使用,請于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養板或培養皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板,HK2貼壁細胞為例)細胞培養取對數生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養至正常狀態。EU標記1、將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標記培養基;2、提前將2×EU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養基孵育細胞2小時,棄培養基。上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家值得信賴?福建品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒

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    EU新生RNA檢測試劑產品簡介細胞內新生RNA的變化是評價細胞活性的重要指標。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在細胞RNA轉錄時期代替尿嘧啶(U)摻入新合成的RNA分子中,然后通過基于EU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EU的RNA分子中,這樣就可以進行較快的的熒光檢測RNA的轉錄活性。本試劑盒將直接測定細胞內新生RNA的變化。傳統的檢測新生RNA的方法為以放射性同位素標記RNA等方法然后進行Southernblot進行檢測。但是這種方法需要放射性同位素標記及后續的復雜操作步驟。利用EU標記新生RNA的檢測方法不需要劇烈的RNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、RNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加便捷、靈敏和準確,能在細胞水**映新生RNA轉錄活性的狀況。該試劑只需要簡單的操作步驟,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及高內涵篩選儀進行新生RNA的轉錄活性。試劑組分產品編號試劑濃度試劑量C01901EU溶液1000×40μl細胞固定液1×15ml反應緩沖液10×1ml催化劑溶液25×400μlTAMRA紅色熒光溶液400×25μl緩沖添加劑粉末200mgHoechst×20μl運輸及保存方式藍冰運輸。-20℃避光長期保存。福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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