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福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

來源: 發布時間:2023-10-16

本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養的細胞(6孔板)的檢測,可以檢測50個樣品,每個樣品的反應體系為500μl的Click反應液;如果用于96孔板檢測,可以檢測500個樣品,每個樣品的檢測體系為50μl的Click反應液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測,分別可以檢測125、250、350和1250個樣品,每個樣品推薦的Click反應液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測,可以檢測125-250個樣品,每個樣品的反應體系為100-200μl的Click反應液。大包裝C0085L可檢測樣品的數量為小包裝C0085S的4倍。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。江西品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。

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使用本試劑盒所做結果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養的細胞(每孔500μl的Click反應液)、96孔板培養的細胞(每孔50μl的Click反應液)、每管細胞數量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應液),不同規格的本產品可以提供的反應的量詳見說明書中的表。光譜特性:488-Azide:綠色熒光,Ex/Em=491/518nm;Hoechst 33342:藍色熒光,Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。

傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發揮重要作用?上海東寰告訴您。

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羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑,經過10mM羥基脲提0min處理的細胞,綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失,因此常被用作EdU實驗的陰性對照。配制好的Click-iT Additive Solution請根據每次用量適當分裝后-20℃保存,避免反復凍融。Click-iT Additive Solution融化后有白色物質析出為正?,F象,請上下顛倒幾次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈現棕色,則說明有效成分降解,不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細胞的細胞懸液,以及其他含多種細胞類型的混合細胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細胞的同時,維持白細胞的光散射特性。本試劑盒做動物實驗時可能需要更多的EdU,請根據實驗需求用合適稀釋液稀釋后使用。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展前景如何呢?品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常*適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。福建EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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