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江蘇肺病疾病動(dòng)物模型建模

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-09-27

1、動(dòng)物模型名稱:固定制動(dòng)致制動(dòng)應(yīng)激大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級。1、實(shí)驗(yàn)方法:采用固定制動(dòng)方法。大鼠每天固定5~6小時(shí)進(jìn)行制動(dòng)應(yīng)激,連續(xù)制動(dòng)40天。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢;曠場試驗(yàn)的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時(shí)與正常對照組比較,模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)、理毛時(shí)間均減少,**格停留時(shí)間、糞便粒數(shù)均增加;ELISA的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時(shí)與正常對照組比較,模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。江蘇肺病疾病動(dòng)物模型建模

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具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個(gè)cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計(jì)grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點(diǎn):**終選取兩個(gè)grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗(yàn)證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。南京阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。

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2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動(dòng)情周期觀察(陰道涂片):3mg組動(dòng)物死亡時(shí)間早,無完整的動(dòng)情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動(dòng)情周期4-5天。分為四個(gè)階段,動(dòng)情前期:撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù),白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動(dòng)情期:角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù),由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動(dòng)情后期:片狀角化上皮細(xì)胞,有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有,無太大差異(圖c)。動(dòng)情間期:白細(xì)胞占絕大多數(shù),有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果:如圖7所示

葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型:1、動(dòng)物模型名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:BALB/c小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:18g-22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法:實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水24h,24小時(shí)后提起鼠尾將其懸空,使掙扎以排出大腸遠(yuǎn)端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉(DSS)溶液,連續(xù)14天。進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)的評估、取結(jié)腸進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):DAI評分明顯升高,與對照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)腸病理鏡檢可見結(jié)腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變.上海東寰為您提供完善的大鼠動(dòng)物疾病模型。

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疾病動(dòng)物模型和人類的關(guān)系科學(xué)研究是探索未知,實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果往往會(huì)出乎意外,不受人為的控制,所以關(guān)乎人類本身的研究,在人體上進(jìn)行試驗(yàn),風(fēng)險(xiǎn)很大;對一些數(shù)量很少的珍稀動(dòng)物,或一些因體型龐大,不易實(shí)施操作的種類,往往用取材容易,操作簡便的另一種動(dòng)物來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,代替人類或原來的目標(biāo)動(dòng)物,這就是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。為了保證這些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)更科學(xué)、準(zhǔn)確和重復(fù)性好,用各種方法把一些需要研究的生理或病理活動(dòng)相對穩(wěn)定地顯現(xiàn)在標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身上,供實(shí)驗(yàn)研究之用。這就稱之為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物模型。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證。上海疾病動(dòng)物模型建模廠家

可以簡化實(shí)驗(yàn)操作和樣品收集。江蘇肺病疾病動(dòng)物模型建模

通過pirb敲入動(dòng)物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點(diǎn)的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗(yàn)證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的結(jié)果圖。江蘇肺病疾病動(dòng)物模型建模

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