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來源: 發布時間:2023-08-28

EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度EdU細胞增殖檢測試劑盒應用再哪些地方?山東EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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    試劑盒以外自備試劑和儀器:●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標儀使用方法:使用注意事項:●接種時注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉淀下來,導致每孔中的細胞數量不等,可以每接種幾個孔就混勻一下。培養板周圍一圈孔培養基容易揮發,為了減少誤差,建議培養板的四邊每孔只加培養基,而不作為指標檢測孔。●培養時間根據細胞種類的不同和每孔內細胞數量的多少而異。●用水或乙酸洗細胞時充滿孔后保持一會倒掉即可,也可以用排或洗板機。●OD值在1-2之間較好。以96孔板為例:1.取出培養好待測的96孔板。2.在培養基表面小心加入50μl固定液(懸浮細胞加100μl固定液),靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細胞可棄培養基后加入用水3倍稀釋的固定液;懸浮細胞必須直接加入固定液,輕加在培養液面,靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時,可使懸浮細胞固定在培養孔底部)。 山東EdU細胞增殖檢測試劑盒價格EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用領域有哪些?

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EdU細胞增殖檢測試劑盒更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應,基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,反應單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細胞也能準確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記,能夠同時檢測細胞其他性狀特征

EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,終使細胞DNA標記上生物素等探針。使用EdU細胞增殖檢測試劑盒前的安全檢查。

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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU細胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復制期間的EdU,借助熒光檢測工具即可準確地檢測出新增殖的細胞,快速統計處于S期的細胞百分數,分析細胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家。河北提供EdU細胞增殖檢測試劑盒

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使用本試劑盒所做結果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養的細胞(每孔500μl的Click反應液)、96孔板培養的細胞(每孔50μl的Click反應液)、每管細胞數量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應液),不同規格的本產品可以提供的反應的量詳見說明書中的表。光譜特性:488-Azide:綠色熒光,Ex/Em=491/518nm;Hoechst 33342:藍色熒光,Ex/Em=346/460nm, bound to DNA。山東EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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