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來源: 發布時間:2023-08-25

EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現用現配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現棕黃色,則需報廢或更換。上海東寰告訴您如何正確使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?提供EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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但該方法由于有放射性污染并且很難實現單細胞檢測而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時會和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續的點擊反應,無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高,是一種在BrdU法基礎上升級換代的新方法,將會逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學發光法(C0065、C0068)都是基于細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。天津提供EdU細胞增殖檢測試劑盒價格上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。

該方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于各種細胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點。EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。

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以及酶或熒光偶聯二抗,檢測單細胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細胞完整性的情況下使抗體結合BrdU。體內外均可進行標記,且可同時使用其他標記進行檢測,操作安全簡便。適用于貼壁或懸浮細胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測法不同,EdU-Click檢測,如EdU-Click594(BCK-EDU594)無需進行DNA變性來檢測摻入的EdU,而是通過一次快速、高度特異性的點擊反應,將EdU高效地摻入到新合成的DNA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應檢測DNA復制活性,從而確地反映細胞的增殖情況。這一類細胞增殖用熒光標記采用溫和的點擊實驗方案,準確且兼容各種抗體實驗方案,整個實驗可在30分鐘內完成,在結果的數據豐富程度方面,堪比多重分析方法。EdU細胞增殖檢測試劑盒運用再哪些領域?湖南口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

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這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常*適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。提供EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

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