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泰州裸鼠疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2023-08-13

1、動物模型名稱:淚腺摘除聯合新潔爾滅致干眼兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:1.8~2.5kg6、實驗動物環境:SPF級,1、實驗方法:摘除淚腺聯合新潔爾滅誘導。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯合肌肉注射進速眠新Ⅱ進行麻醉。麻醉后,進行淚腺摘除手術,眼瞼局部以75%酒精消毒,鋪洞巾,于眼下眶周部做一切口,小心分離皮膚、肌肉、筋膜,尋找到淚腺后完整摘除之,然后縫合創口。術畢,滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環素可的松眼藥膏,共7d。術后兔創口愈合后進行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液,2次/天,2滴/次,連續用藥14d。2、檢測標準:SchirmerI試驗淚液分泌減少,1%虎紅角膜染色試驗虎紅著色評分值高,角膜出現病理改變。利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進行實驗的人類疾病的研究。泰州裸鼠疾病動物模型建模

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麻醉小鼠,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管,將1mL注射器經兩氣管軟骨環間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力,則注入博萊霉素5mg/kg/L(對照組注入等量的生理鹽水)。手術完畢后迅速將動物直立、旋轉,使藥液在肺內分布均勻,動物清醒后常規飼養。4.2模型鑒定及后續檢測:肺纖維化模型發展時間:給藥后第7天肺組織大多呈重度肺泡炎改變,肺泡腔及肺間質內有大量中性粒細胞浸潤,部分肺泡腔破壞或消失,肺間隔內成纖維細胞和增生,與正常肺組織對比差別明顯;給藥后第14天,肺纖維化開始形成。巨噬細胞、中性粒細胞等炎性細胞明顯減少,成纖維細胞增多,肺泡間隔明顯增厚,有膠原沉積。給藥后第28天,多數小鼠發生彌漫性肺間質纖維化,肺間質被膠原纖維和成纖維細胞替代,肺泡壁破壞,肺大泡形成,但仍可見炎性細胞浸潤。常州Balbc裸鼠疾病動物模型建模生物醫學研究的進展常常依賴于使用動物模型作為實驗假說和臨床假說二者的試驗基礎。

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步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉速旋轉15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應:長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產物。

即為本發明構建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發明所采用第二種技術方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構。步驟3中grna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發明的有益效果是:本發明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法,本發明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發揮調節作用的下游機制。動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發現及篩選。

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水楊酸性胃潰瘍模型:大鼠禁食后水楊酸灌胃。4、結扎幽門法潰瘍模型:大鼠麻醉后在無菌技術下結扎幽門。此模型適合做探索抗潰瘍病藥物研究和胃潰瘍發病機制方面的研究。三、動物模型(animalmodelofhypertension)1、腎動脈狹窄性模型:在腎動脈上造成腎動脈狹窄。如果是單側腎動脈狹窄,則在間隔10~12d后將另一側腎摘除。手術幾天后,血壓開始升高,1~3個月后血壓升至高峰,并可長期維持下去。2、腎外包扎性模型:腎外異物包扎,壓迫腎實質,造成腎組織缺血,使腎素形成增加,血壓上升。3、應激性模型:應激性大鼠模型常采用噪聲和足底電擊的復合刺激,每天2次,每次2h,約20d大鼠可形成小鼠疾病建模請找上海東寰。泰州成瘤疾病動物模型建模

動物模型的優越性主要表現在以下幾下方面!泰州裸鼠疾病動物模型建模

1、動物模型名稱:固定制動致制動應激大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環境:SPF級。1、實驗方法:采用固定制動方法。大鼠每天固定5~6小時進行制動應激,連續制動40天。2、檢測標準:模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢;曠場試驗的結果顯示,造模結束時與正常對照組比較,模型組大鼠的水平穿越格數、垂直運動次數、理毛時間均減少,**格停留時間、糞便粒數均增加;ELISA的結果顯示,造模結束時與正常對照組比較,模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。泰州裸鼠疾病動物模型建模

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