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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-02-12

與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。天津品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好

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EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。浙江品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒能給人們帶來(lái)便利嗎?

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細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。

EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒(méi)有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào),分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)。

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細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來(lái)評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的控制作用。經(jīng)過(guò)之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè),此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長(zhǎng)時(shí)間停留在細(xì)胞中。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。天津品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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現(xiàn)在有一種新的檢測(cè)方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測(cè)。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見,在細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比,更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。天津品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好

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