DNA探針根據其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DN...
在原核表達系統中外源基因不僅進行正向轉錄,有時還存在反向轉錄(即生成反義RNA),這種現象往往是外源基因表達不高的重要原因。另外,在真核系統,某些基因也存在反向轉錄,產生反義RNA,參與自身表達的調控。在這些情況下,要準確測定正向和反向轉錄水平就不能用雙鏈DNA探針,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應并帶有供反應后檢測的合適標記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補的原理,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補,以檢測被測靶序列的技術叫核酸探針技術。探針制備就是將目的基因進行標記。分析范圍廣。Z>4其中,波譜:Be~...
***臺電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。1953年前蘇聯制成了X射線微區分析儀,以后英、美等國陸續生產。***臺掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對試樣作點或微區分析,而且能對樣品表面微區進行掃描。原子序數12至22的元素要在真空下進行成分測定,原子序數12以內的元素需要增添一些特殊設備才能分析。原子序數50以上的元素用L系X射線光譜進行分析,原子序數50以下的元素也可以分析,如Sn(50)可用K系x射線光譜進行分析。 [2]這種神秘的Wi-Fi探針,實際是“WiFi信道掃描工具”。奉賢區質量探針銷售廠家為了制備cDNA 探針,首先需分離純化相...
X射線譜儀能譜儀電子束轟擊樣品表面將產生特征X射線,不同的元素有不同的X射線特征波長和能量。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),利用特征能量的就稱為能量色散譜儀(能譜儀)。1、波譜儀波譜儀的關鍵在于怎樣實現將未知的特征譜線與已知元素Z聯系起來?為此設想有一種晶面間距為d的特定晶體(我們稱為分光晶體),當不同特征波長λ的X射線照射其上時,如果滿足布拉格條件(2dsinθ=λ)將產生衍射。顯然,對于任意一個給定的入射角θ*有一個確定的波長λ滿足衍射條件。能兼作透射電鏡、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等。嘉定區標準探針售價電子...
③末端標記法(又叫尾標)。利用末端轉移酶可進行“尾標”,尾標適用于寡核苷酸探針標記,寡核苷酸探針多用于核酸“點”突變的檢測,該探針可用核酸合成儀人工合成,克隆出的探針一般較長,特異性好,標記量大,雜交的檢出信號強。探針合成的注意事項①合成探針的長短,一般在20~50個核苷酸之間。合成過長成本高,且易出現聚合酶合成錯誤,雜交時間長,合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應含40%~60%,一種堿基連續重復不超過4個,以免非特異性雜交產生。③探針自身序列內應無互補區域,以免產生“發夾”結構,影響雜交。總之,一個好的探針**終要在實踐中才能加以確認。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素...
探針DNA克隆的篩選也可采用血清學方法,所不同的是所建DNA文庫為可表達性,克隆菌落或噬斑經裂解后釋放出表達抗原,然后用來源細菌的多克隆抗血清篩選陽性克隆,所得到多個陽性克隆再經其它細菌的抗血清篩選,***只與本細菌抗血清反應的表達克隆即含有此細菌的特異性基因片段,它所編碼的蛋白是該菌種所特有的。用這種表達文庫篩選得到的顯然只是特定基因探針。對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質,然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列,然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜...
2、能譜儀來自樣品的X光子通過鈹窗口進入鋰漂移硅固態檢測器。每個X光子能量被硅晶體吸收將在晶體內產生電子空穴對。不同能量的X光子將產生不同的電子空穴對數。例如,Fe的Kα輻射可產生1685個電子空穴對,而Cu為2110。知道了電子空穴對數就可以求出相應的電荷量以及在固定電容(1μμF)上的電壓脈沖。多道脈沖高度分析器中的數模轉換器首先把脈沖信號轉換成數字信號,建立起電壓脈沖幅值與道址的對應關系(道址號與X光子能量間存在對應關系)。當某一X射線光子進入計數管后,管內氣體電離,并在電場作用下產生電脈沖信號。閔行區特制探針五星服務2.界面探針(Interface Probes)非標準的探針,一般是為...
DNA探針根據其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個堿基的與基因序列互補的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DN...
在不損耗試樣的情況下,電子探針通常能分析直徑和深度不小于1微米范圍內、原子序數4以上的所有元素;但是對原子序數小于12的元素,其靈敏度較差。常規分析的典型檢測相對靈敏度為萬分之一,在有些情況下可達十萬分之一。檢測的***靈敏度因元素而異,一般為10-14~10-16克。用這種方法可以方便地進行點、線、面上的元素分析,并獲得元素分布的圖象。對原子序數高于10、濃度高于10%的元素,定量分析的相對精度優于±2%。電子探針儀是 X射線光譜學與電子光學技術相結合而產生的。1948年法國的R.卡斯坦制造了***臺電子探針儀。1958年法國首先制造出商品儀器。電子探針儀與掃描電子顯微鏡在結構上有許多共同處...
體外轉錄技術不斷完善,已相繼建立了單向和雙向體外轉錄系統。該系統主要基于一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點兩側分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉錄生成RNA。這種體外轉錄反應效率很高,在1h內可合成近10μg的RNA產生,只要在底物中加入適量的放射性或生物素標記的NTP,則所合成的RNA可得到高效標記。該方法能有效地控制探針的長度并可提高標記物的利用率。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),利用特征能量的就稱為能量色散...
在原核表達系統中外源基因不僅進行正向轉錄,有時還存在反向轉錄(即生成反義RNA),這種現象往往是外源基因表達不高的重要原因。另外,在真核系統,某些基因也存在反向轉錄,產生反義RNA,參與自身表達的調控。在這些情況下,要準確測定正向和反向轉錄水平就不能用雙鏈DNA探針,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應并帶有供反應后檢測的合適標記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補的原理,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補,以檢測被測靶序列的技術叫核酸探針技術。探針制備就是將目的基因進行標記。(1)電子光學系統。電子束直徑0.1...
值得一提的是,通過改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的轉錄方向,即以哪條DNA鏈以模板轉錄RNA。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補),反義RNA又稱cRNA,除可用于反義核酸研究外,還可用于檢測mRNA的表達水平。在這種情況下,因為探針和靶序列均為單鏈,所以雜交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個數量級。RNA探針除可用于檢測DNA和mRNA外,還有一個重要用途,在研究基因表達時,常常需要觀察該基因的轉錄狀況。波譜儀的關鍵在于怎樣實現將未知的特征譜線與已知元素Z聯系起來?青浦區質量探針維修價格特異性探針有三種形式——cDN...
早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析(nuclearrunontranscrip-tionassay)時,在體外將細胞核分離出來,然后在α-32P-ATP的存在下進行轉錄,所合成mR-NA均摻入同位素而得到標記,此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾...
值得一提的是,通過改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的轉錄方向,即以哪條DNA鏈以模板轉錄RNA。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補),反義RNA又稱cRNA,除可用于反義核酸研究外,還可用于檢測mRNA的表達水平。在這種情況下,因為探針和靶序列均為單鏈,所以雜交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個數量級。RNA探針除可用于檢測DNA和mRNA外,還有一個重要用途,在研究基因表達時,常常需要觀察該基因的轉錄狀況。后期生產的儀器,可作X射線背散射照相、照相。靜安區標準探針商家電子探針可以對試樣中微小區域(微米級)的化學組成進行...
這樣我們可以事先建立一系列θ角與相應元素的對應關系,當某個由電子束激發的X特征射線照射到分光晶體上時,我們可在與入射方向交成2θ角的相應方向上接收到該波長的X射線信號,同時也就測出了對應的化學元素。只要令探測器連續進行2θ角的掃描,即可在整個元素范圍內實現連續測量。由分光晶體所分散的單一波長X射線被X射線檢測器接受,常用的檢測器一般是正比計數器。當某一X射線光子進入計數管后,管內氣體電離,并在電場作用下產生電脈沖信號。不隨意安裝非正規商家應用App、及各類廣告插件App,使用正規合法App是保護個人信息;黃浦區特制探針推薦貨源為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交,有必要對探針加以標記,以便...
探針DNA克隆的篩選也可采用血清學方法,所不同的是所建DNA文庫為可表達性,克隆菌落或噬斑經裂解后釋放出表達抗原,然后用來源細菌的多克隆抗血清篩選陽性克隆,所得到多個陽性克隆再經其它細菌的抗血清篩選,***只與本細菌抗血清反應的表達克隆即含有此細菌的特異性基因片段,它所編碼的蛋白是該菌種所特有的。用這種表達文庫篩選得到的顯然只是特定基因探針。對于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質,然后測定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列,然后根據這一序列合成一套寡核苷酸探針。計算時應用布拉格方程:nλ=2dsinθ。徐匯區標準探針維修...
DNA探針是**常用的核酸探針,指長度在幾百堿基對以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針。現已獲得DNA探針數量很多,有細菌、病毒、原蟲、***、動物和人類細胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的,如細菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。以細菌為例,分子雜交技術用于細菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準確的多,是細菌分類學的一個發展方向。加之分子雜交技術的高敏感性,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。還能全自動進行批量(預置9999測試點)定量分析。普陀區特制探針銷售廠家(3)X射...
探針的標記方式有放射性標記和非放射性標記。標記物質有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(如生物素、地高辛等)。32P是**常用的核苷酸標記同位素,被標記的dNTP本身就帶有磷酸基團,便于標記。特點是比活性高,可達9000Ci/mmol;發射的β射線能量高。用它標記的探針自顯影時間短,靈敏度高。32P的半壽期短,雖使用不方便,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標記法有酶標法和化學物標記法。酶標方法與免疫測定ELISA方法相似,只是被標記的核酸代替了被標記的抗體,事實上被標記的抗體也稱為探針,現有許多商品是生物素、地高辛標記的。把電子顯微鏡和電子探針結合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素...
電子探針分析是指以聚焦的高速電子來激發出試樣表面組成元素的特征X射線,對微區成分進行定性或定量分析的一種材料物理試驗,又稱電子探針X射線顯微分析。電子探針分析的原理是:以動能為10~30千電子伏的細聚焦電子束轟擊試樣表面,擊出表面組成元素的原子內層電子,使原子電離,此時外層電子迅速填補空位而釋放能量,從而產生特征X射線。電子探針的功能主要是進行微區成分分析。它是在電子光學和X射線光譜學原理的基礎上發展起來的一種高效率分析儀器。其原理是用細聚焦電子束入射樣品表面,激發出樣品元素的特征x射線,分析特征X射線的波長(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(定性分析),分析X射線的強度,則可知道樣品...
電子探針是運用電子所形成的探測針(細電子束)作為X射線的激發源來進行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對象是固體物質表面細小顆粒或微小區域,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學成分的元素范圍一般從原子序數12(Mg)至92(U),原子序數大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外,后期生產的儀器,可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等。波譜儀的關鍵在于怎樣實現將未知的特征譜線與已知元素Z聯系起來?上海優勢探針售價...
為了制備cDNA 探針,首先需分離純化相應mRNA,這從含有大量mRNA的組織、細胞中比較容易做到,如從造血細胞中制備α或β珠蛋白mRNA。有了mRNA作模板后,在逆轉錄酶的作用下,就可以合成與之互補的DNA(即cDNA),cDNA與待測基因的編碼區有完全相同的堿基順序,但內含子已在加工過程中切除。寡核苷酸探針是人工合成的,與已知基因DNA互補的,長度可從十幾到幾十個核苷酸的片段。如*知蛋白質的氨基酸順序量,也可以按氨基酸的密碼推導出核苷酸序列,并用化學方法合成。利用探針盒子獲取他人手機號等隱私信息的行為涉嫌侵犯他人隱私,可能面臨民事侵權責任及治安管理處罰責任。上海特制探針商家DNA探針是**...
為了制備cDNA 探針,首先需分離純化相應mRNA,這從含有大量mRNA的組織、細胞中比較容易做到,如從造血細胞中制備α或β珠蛋白mRNA。有了mRNA作模板后,在逆轉錄酶的作用下,就可以合成與之互補的DNA(即cDNA),cDNA與待測基因的編碼區有完全相同的堿基順序,但內含子已在加工過程中切除。寡核苷酸探針是人工合成的,與已知基因DNA互補的,長度可從十幾到幾十個核苷酸的片段。如*知蛋白質的氨基酸順序量,也可以按氨基酸的密碼推導出核苷酸序列,并用化學方法合成。可以進行點、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。寶山區標準探針五星服務電子探針儀(圖1)主要包括:探針形...
(1)電子光學系統。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。被激發原子發射特征X射線譜過程如下:圍繞原子核運動的內層電子,被電子束的電子轟擊后,其他外層電子為補充轟擊出的電子而發生躍遷,在躍遷過程中釋放出能量,即發射出X射線。(2)X射線譜儀。測量各種元素產生的X射線波長和強度,并以此對微小體積中所含元素進行定性和定量分析。特征X射線圖像顯像管的原理是:X射線束入射到一已知晶面間距的晶體上(X射線分光光度計的彎曲晶體上),經衍射后各種波長的X射線按不同的布拉格角彼此分開,因此如轉動晶體,改變衍射角,同時以兩倍于晶體的轉速轉動計數器,就可以依次測量出各種元素所產生的X射線波長和強度,...
***臺電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。1953年前蘇聯制成了X射線微區分析儀,以后英、美等國陸續生產。***臺掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對試樣作點或微區分析,而且能對樣品表面微區進行掃描。原子序數12至22的元素要在真空下進行成分測定,原子序數12以內的元素需要增添一些特殊設備才能分析。原子序數50以上的元素用L系X射線光譜進行分析,原子序數50以下的元素也可以分析,如Sn(50)可用K系x射線光譜進行分析。 [2]對于任意一個給定的入射角θ有一個確定的波長λ滿足衍射條件。崇明區質量探針維修價格這樣我們可以事先建立一系列θ角與相應元素...
3 面分析用于測定某種元素的面分布情況。方法是將X射線譜儀固定在所要測量的某元素特征X射線信號的位置上,電子束在樣品表面做光柵掃描,此時在熒光屏上便可看到該元素的面分布圖像。顯像管的亮度由試樣給出的X射線強度調制。圖像中的亮區表示這種元素的含量較高。定量分析定量分析時,先測得試樣中Y元素的特征X射線強度IY,再在同一條件下測出已知純元素Y的標準試樣特征X射線強度IO。然后兩者分別扣除背底和計數器死時間對所測值的影響,得到相應的強度值IY和IO,兩者相除得到X射線強度之比KY= IY / IO。 直接將測得的強度比KY當作試樣中元素Y的重量濃度,其結果還有很大誤差,通常還需進行三種效應的修正。即...
電子探針分析是指以聚焦的高速電子來激發出試樣表面組成元素的特征X射線,對微區成分進行定性或定量分析的一種材料物理試驗,又稱電子探針X射線顯微分析。電子探針分析的原理是:以動能為10~30千電子伏的細聚焦電子束轟擊試樣表面,擊出表面組成元素的原子內層電子,使原子電離,此時外層電子迅速填補空位而釋放能量,從而產生特征X射線。電子探針的功能主要是進行微區成分分析。它是在電子光學和X射線光譜學原理的基礎上發展起來的一種高效率分析儀器。其原理是用細聚焦電子束入射樣品表面,激發出樣品元素的特征x射線,分析特征X射線的波長(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(定性分析),分析X射線的強度,則可知道樣品...
***臺電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。1953年前蘇聯制成了X射線微區分析儀,以后英、美等國陸續生產。***臺掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對試樣作點或微區分析,而且能對樣品表面微區進行掃描。原子序數12至22的元素要在真空下進行成分測定,原子序數12以內的元素需要增添一些特殊設備才能分析。原子序數50以上的元素用L系X射線光譜進行分析,原子序數50以下的元素也可以分析,如Sn(50)可用K系x射線光譜進行分析。 [2]“Wi-Fi信道掃描工具”處于被動監測模式,無需用戶主動連接某個WiFi,需打開手機WiFi功能時即可捕獲。青浦區質量探...
2.手機偽隨機mac某些手機品牌對WiFi探針技術進行了防護,在未連接WiFi的情況下手機廣播的是隨機mac,即使被WiFi探針設備捕獲也無法關聯到用戶正確信息。這種偽隨機mac可避免無任何操作下WiFi探針對當前環境的被動監測,iOS 9.0以上版本也有類似機制。3. WiFi誘導但偽隨機mac機制并不能完全保證用戶網絡安全,因為WiFi協議默認當用戶連接過某個WiFi后,再次發現同名**WiFi即可自動連接。處于WiFi連接狀態的真實手機mac地址即可被捕獲,設備廠家則利用協議機制誘導用戶連接偽造WiFi,從而捕獲到用戶手機mac信息。電子束轟擊樣品表面將產生特征X射線,不同的元素有不同的...
***臺電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。1953年前蘇聯制成了X射線微區分析儀,以后英、美等國陸續生產。***臺掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對試樣作點或微區分析,而且能對樣品表面微區進行掃描。原子序數12至22的元素要在真空下進行成分測定,原子序數12以內的元素需要增添一些特殊設備才能分析。原子序數50以上的元素用L系X射線光譜進行分析,原子序數50以下的元素也可以分析,如Sn(50)可用K系x射線光譜進行分析。 [2](1)電子光學系統。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。徐匯區優勢探針現價電子探針分析是指以聚焦的高速電...
電子探針儀(圖1)主要包括:探針形成系統 (電子槍、加速和聚焦部件等)、X射線信號檢測系統和顯示、記錄系統、樣品室、高壓電源和掃描系統以及真空系統。電子探針的**早應用領域是金屬學。對合金中各組成相、夾雜物等可作定性和定量分析,直觀而方便,還能較準確地測定元素的擴散和偏析情況。此外,它還可用于研究金屬材料的氧化和腐蝕問題,測定薄膜、滲層或鍍層的厚度和成分等,是機械構件失效分析、生產工藝的選擇、特殊用材的剖析等的重要手段。圖2為鎂合金中稀土氧化物在晶界析出的電子探針分析照片。2019年曝光的WiFi探針技術,甚至無需用戶主動連接WiFi即可捕獲個人信息。普陀區品牌探針品牌為了確定探針是否與相應的...