分光光度計的簡單原理:分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。核酸的定量:核酸的定量是分光光度計使用頻率比較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的比較高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數。如:1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Oli...
紫外可見分光光度計按照什么原理制作的?一些朋友也是了解不清楚。這就造成了使用中的盲目情況發生,畢竟只有知道設備制造原理,才能好的進行操作并獲得準確的測量結果。紫外可見分光光度計按照什么原理制作的?從專業角度說,該設備就是依據物質吸收光譜效應原理制成的,使用這種設備不僅*能夠研究相關物質的成分和結構,而且還能用來研究相關物質的相互作用。市場中常見的紫外可見分光光度計往往會具有這些優勢特點:優勢特點一:能夠采用大屏幕液晶顯示器和中英文雙語操作界面,并具有顯示標準的曲線、波長掃描、動力學掃描各種圖譜等功能。整個操作界面不僅*具有強的簡單操作性,而且還有好的便捷性。優勢特點二:在紫外可見分...
在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現了柔韌性。數據管理(DATAMANAGEMENT)大部分單機型的分光光度計包含了驅動儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器,通常與PC機一起聯用,需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。另外一個值得考慮的因素是數據的很終使用...
在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現了柔韌性。數據管理(DATAMANAGEMENT)大部分單機型的分光光度計包含了驅動儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器,通常與PC機一起聯用,需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。另外一個值得考慮的因素是數據的很終使用...
在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現了柔韌性。數據管理(DATAMANAGEMENT)大部分單機型的分光光度計包含了驅動儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器,通常與PC機一起聯用,需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。另外一個值得考慮的因素是數據的很終使用...
紫外可見分光光度計雖然有好的使用效果,整個使用會非常的精確,不過在對這種設備安裝時候會對安裝環境有一定要求的,具體往往表現在以下這些方面:方面一:如果是在實驗室環境下安裝紫外可見分光光度計設備的話,不僅*對環境的溫度和潔凈度情況有一定要求,而且對光核磁場干擾情況也有一定要求;一般環境溫度儀器要能安裝在干燥房間內,保持房間溫度要在5-35攝氏度左右,要能夠保證的室內濕度不能超過百分之八十五,比較好的濕度要能控制在百分之四十五到百分之六十五之間,如果有條件的話可以進行配備去濕機和溫度計等,當室內環境下濕度相對比較大的話還需能在設備周圍放上一些干燥劑才行。方面二:在安裝紫外可見分光光度計...
原子熒光分析法。氣態自由原子吸收特征波長的輻射后,原子的外層電子從基或低能態躍遷到高能態,約經10-8S,又躍遷至基態或低能態,同時發射出與原激發長相同或不同的輻射,稱為原子熒光。波長在紫外和可見光區。在與激發光源成一定角度(通常為90。)的方向測量熒光的強度,可以進行定量分析。原子吸收光譜分析法。利用待測元素氣態原子對共振線的吸收進行定量測定的方法。其吸收機理是對共振線的吸收導致原子的外層電子能級躍遷,所吸收波長在紫外、可見和近紅外區。紫外分光光度分析法此法是利用溶液中分子吸收紫外光而產生躍遷所記錄的吸收光譜圖,可進行化合物結構分析,根據比較大吸收波長強度變化可進行定量分析。可見...
紫外可見分光光度計的常見問題。1.讀數向增大或減小,單方向不停地漂移-預熱時間不夠:預熱時間至少30分鐘。-儀器受環境因素影響,機內受潮:延長預熱時間并降低環境濕度。2.不能調:去掉擋光物體若樣品架擋光,則調整樣品架位置。-用來校零的空白溶液與空氣的吸光度之差超過:更換低濃度的空白溶液。-前置放大板壞:修理前置放大板。-輪胎鏡老化:更換輪胎鏡。-濾**組件的定位出現偏移:調整濾**光電開關位置。-光源燈老化:更換新的光源燈。-注意:在開始自檢時,要求濾**組件的空擋處于狹縫前方的對稱位置。3.測量數據不準-比色皿污染:洗液浸泡后擦凈比色皿內外透光面。-比色皿配對值差:校準配對比色皿...
紫外可見分光光度計分光系統分光系統是紫外可見分光光度計的重要部分。它主要由入射狹縫、準直鏡、光柵、物鏡和出射狹縫組成。入射狹縫起著限制雜散光進入的作用,它一般處在準直鏡的焦點上;準直鏡將從入射狹縫射進來的復合光變成平行光;光柵用來分光,分光系統有三個作用:①分光,把從入射狹縫進來,投射到光柵上的復合光分成單色光;②轉向,把從準直鏡射過來的平行光改變方向,投射到物鏡上;③能量傳遞,把從準直鏡射過來的平行光的能量改變方向后傳遞到物鏡;如果是Ⅳ型凹面光柵,則還有成像的功能,將從入射狹縫進來射到光柵的發散光會聚并成像到出射狹縫上;出射狹縫起限制光譜帶寬的作用。色散元件有棱鏡和光柵兩種。環...
分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長下測量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導體研究需要的光譜范圍。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiH...
狹縫的大小會影響到儀器的信噪比和標準曲線的線性范圍。狹縫過大,通常會使線性范圍變小,特別是當不在比較大吸收波長位置測定時更是如此。狹縫過小,信噪比變差,基線平直度和測量數據的重復性會變差。此外,還需要考慮樣品吸收峰寬度的影響。通常單波長測定時,一般選擇在比較大吸收波長位置,線性范圍容易滿足,可選擇較寬的狹縫(1~2nm)多波長測定時,很難同時在所有波長都滿足線性范圍要求,應選擇比較小的狹縫。對吸光度不是很大的樣品,或者狹縫不是很小,這是檢測器檢測的光信號的強度是比較大的,重復性較好,可選擇較少的重復次數。相反,如果樣品吸光度很大,狹縫很小,選擇較大的重復次數可獲得更好的結果。...
紫外可見分光光度計分光系統分光系統是紫外可見分光光度計的重要部分。它主要由入射狹縫、準直鏡、光柵、物鏡和出射狹縫組成。入射狹縫起著限制雜散光進入的作用,它一般處在準直鏡的焦點上;準直鏡將從入射狹縫射進來的復合光變成平行光;光柵用來分光,分光系統有三個作用:①分光,把從入射狹縫進來,投射到光柵上的復合光分成單色光;②轉向,把從準直鏡射過來的平行光改變方向,投射到物鏡上;③能量傳遞,把從準直鏡射過來的平行光的能量改變方向后傳遞到物鏡;如果是Ⅳ型凹面光柵,則還有成像的功能,將從入射狹縫進來射到光柵的發散光會聚并成像到出射狹縫上;出射狹縫起限制光譜帶寬的作用。怎么維護紫外可見分光光度計:...
日常在使用分光光度計時,是否要經常進行儀器波長準確度的檢查?答案是否定的。當在日常測定中發現儀器測定靈敏度下降,這時才應進行波長準確度的檢查,**簡易的檢查方法(粗檢)是:儀器開機后,調節波長為580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀察到一長方形的黃色光斑,說明波長準確度屬正常范圍,否則就應進行波長校正。當儀器經過長途搬運、受過機械振動或更換光源燈泡后,必須進行波長準確度的檢查與校正。粗檢同上,其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發射線校正法。具體步驟可參考儀器使用說明書。紫外可見分光光度計主要特點:較低的雜散光。民用紫外可見分光光度計設備 ...
紫外可見分光光度計光學系統的重要性,光學類分析儀器肯定有光電轉換系統,只是光電轉換系統的類型不同、結構不同而已。例如,有的用光電管,有的用光電倍增管,有的用硅光電池,有的用二極管陣列或CCD,有些儀器采用。因為,光學類的分析都必須要將光信號轉換成電信號后,才能進行電學處理、計算、輸出打印,所以,任何光學類分析儀器都必須要有相應的光電轉換系統。而且這個系統中的光電元件本身的質量必須穩定可靠,必須有很高的光電轉換效率(靈敏度),有相應的光譜響應范圍,否則不可能保證儀器正常工作。同時,有的元件還必須加一個穩定的直流電源,組成穩定的光電系統,才能保證儀器正常工作。例如,光電管必須加一個穩定...
紫外可見分光光度計的常見問題。1.讀數向增大或減小,單方向不停地漂移-預熱時間不夠:預熱時間至少30分鐘。-儀器受環境因素影響,機內受潮:延長預熱時間并降低環境濕度。2.不能調:去掉擋光物體若樣品架擋光,則調整樣品架位置。-用來校零的空白溶液與空氣的吸光度之差超過:更換低濃度的空白溶液。-前置放大板壞:修理前置放大板。-輪胎鏡老化:更換輪胎鏡。-濾**組件的定位出現偏移:調整濾**光電開關位置。-光源燈老化:更換新的光源燈。-注意:在開始自檢時,要求濾**組件的空擋處于狹縫前方的對稱位置。3.測量數據不準-比色皿污染:洗液浸泡后擦凈比色皿內外透光面。-比色皿配對值差:校準配對比色皿...
紫外可見分光光度計分光系統分光系統是紫外可見分光光度計的重要部分。它主要由入射狹縫、準直鏡、光柵、物鏡和出射狹縫組成。入射狹縫起著限制雜散光進入的作用,它一般處在準直鏡的焦點上;準直鏡將從入射狹縫射進來的復合光變成平行光;光柵用來分光,分光系統有三個作用:①分光,把從入射狹縫進來,投射到光柵上的復合光分成單色光;②轉向,把從準直鏡射過來的平行光改變方向,投射到物鏡上;③能量傳遞,把從準直鏡射過來的平行光的能量改變方向后傳遞到物鏡;如果是Ⅳ型凹面光柵,則還有成像的功能,將從入射狹縫進來射到光柵的發散光會聚并成像到出射狹縫上;出射狹縫起限制光譜帶寬的作用。靈敏度的定量定義是校正靈敏度...
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:樣品容器不同的光譜儀中,樣品容器的結構差異較大,在反射光譜儀中甚至沒有專門的樣品容器,在吸收光譜中,樣品容器也稱為吸收池。吸收池一般由光透明的材料制成。在紫外光區,采用石英材料;可見光區,則用硅酸鹽玻璃;紅外光區,則可根據不同的波長范圍選用不同材料的晶體制成吸收池的窗口。檢測器檢測器是將一種類型的信號轉變成另一種類型的信號的器件,如在分光光度計中的光電管,是將光能轉變成電能的元件。檢測器可分為兩類,一類對光子有響應的光檢測器,另一類為對熱產生響應的熱檢測器。光檢測器有硒光電池、光電管、光電倍增管、半導體等。熱檢測器是吸牧輻射并根據吸收引起...
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:數據處理系統據處理系統主要有計算機、數據通信部件和儀器控制及數據處理軟件組成。通常由檢測器將光信號轉換成電信號后,還須經過一定的信號處理器處理,如對電信號進行放大、衰減、積分、微分、相加、差減等;也可通過整流使其變為直流信號,或將其轉變成交流信號。處理的目的是將檢測器檢測到的信號轉變成一種可以被人讀出的信號,如可用檢流計、微安計數字顯示器、計算機顯示和記錄結果。目前,紫外可見分光光度計等光譜儀器大多數是通過專門的操作軟件在計算機中進行數據處理,可進行儀器操作、定性定量分析、記錄保存等。紫外可見分光光度計主要特點:出色的穩定性。環保紫外可見分光光度計單...
紫外可見分光光度計出現問題處理方法1、儀器電源接通后,光源不亮。原因:①光源燈泡已損壞。②保險管燒壞。處理方法:①更換氘燈或鎢燈。②更換保險管。2、紫外可見分光光度計噪音較大。原因:光源燈泡使用時間超過壽命期。處理方法:更換光源燈泡。3、自檢時提示波長自檢出錯。原因:自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。處理方法:關上儀器樣品室蓋子,重新自檢。4、儀器自檢時提示通訊錯誤。原因:儀器與電腦之間的數據線沒有連接好。處理方法:連接好數據線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。5、儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上。原因:在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調整,這種電位器一般是炭膜電阻制作...
紫外可見分光光度計就是傳統意義上的光譜儀嗎?是很多朋友們想要知道的,雖然在市場中不是全部朋友都認為這兩種設備就是同一樣設備,但是占相當大一部分朋友總把紫外可見分光光度計成為光譜儀設備,感覺這兩種設備就是一樣的。從專業角度情況看紫外可見分光光度計就是一種測定波長的相關設備,而光譜儀就是一種可以自己繪制光譜圖的相關設備,在整個實際使用中廣大用戶使用紫外可見分光光度計就能將成分復雜的光給直接分解出光譜線,該設備在測量范圍內包括的波長為380-780nm,而能夠進行可視的光區和波長范圍都在200-380紫外光區中;市場中使用的光譜儀能以光電倍增管等光探測器進行測量譜線不同波長位置強度的設備...
分光光度計使用注意事項1、紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。2、筆式PH計測定時,禁止將試劑或液體物質放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因將樣品槽弄臟,要盡可能及時清理干凈。3、比色皿內溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔,池壁上液滴應用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。4、實驗結束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關電源將干燥劑放入樣品室內,蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認可方可離開。一般連續光源主要用于分子吸收光譜...
日常在使用分光光度計時,是否要經常進行儀器波長準確度的檢查?答案是否定的。當在日常測定中發現儀器測定靈敏度下降,這時才應進行波長準確度的檢查,**簡易的檢查方法(粗檢)是:儀器開機后,調節波長為580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀察到一長方形的黃色光斑,說明波長準確度屬正常范圍,否則就應進行波長校正。當儀器經過長途搬運、受過機械振動或更換光源燈泡后,必須進行波長準確度的檢查與校正。粗檢同上,其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發射線校正法。具體步驟可參考儀器使用說明書。檢出限是指能以適當的置信概率被檢出的組分的較小量或較小濃度。生產紫外可見...
一般來說,紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進行測量。一束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結果。雙光束型則是通過一個斬光輪(mirroredchopperwheel)將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品。可以**小化光漂移(lampdrift)和減少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態變化的研究中大有用處。在安裝紫外可見分光光度計設備時候,需要去一些無強光...
在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預熱時間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計,開機后儀器自動進入自檢(初始化)狀態,約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個環節上,很多使用者或多或少存在問題,如開機只預熱電路系統(不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等等。對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機后儀器自檢(初始化)結束后,在測定窗口上,設置所需波長值,用一個吸收池裝上純凈水置于光路上,調“0000A”后,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化后即可進行測定。對于紫外可見分光光度計,由于有雙光源(鎢燈與氘燈),為了延長燈的使用壽命,開機自檢完成后可以關掉測定...
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:數據處理系統據處理系統主要有計算機、數據通信部件和儀器控制及數據處理軟件組成。通常由檢測器將光信號轉換成電信號后,還須經過一定的信號處理器處理,如對電信號進行放大、衰減、積分、微分、相加、差減等;也可通過整流使其變為直流信號,或將其轉變成交流信號。處理的目的是將檢測器檢測到的信號轉變成一種可以被人讀出的信號,如可用檢流計、微安計數字顯示器、計算機顯示和記錄結果。目前,紫外可見分光光度計等光譜儀器大多數是通過專門的操作軟件在計算機中進行數據處理,可進行儀器操作、定性定量分析、記錄保存等。靈敏度的定量定義是校正靈敏度,它是指在測定濃度范圍中校正曲線的斜率...
紫外可見分光光度計的常見問題。1.讀數向增大或減小,單方向不停地漂移-預熱時間不夠:預熱時間至少30分鐘。-儀器受環境因素影響,機內受潮:延長預熱時間并降低環境濕度。2.不能調:去掉擋光物體若樣品架擋光,則調整樣品架位置。-用來校零的空白溶液與空氣的吸光度之差超過:更換低濃度的空白溶液。-前置放大板壞:修理前置放大板。-輪胎鏡老化:更換輪胎鏡。-濾**組件的定位出現偏移:調整濾**光電開關位置。-光源燈老化:更換新的光源燈。-注意:在開始自檢時,要求濾**組件的空擋處于狹縫前方的對稱位置。3.測量數據不準-比色皿污染:洗液浸泡后擦凈比色皿內外透光面。-比色皿配對值差:校準配對比色皿...
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:數據處理系統據處理系統主要有計算機、數據通信部件和儀器控制及數據處理軟件組成。通常由檢測器將光信號轉換成電信號后,還須經過一定的信號處理器處理,如對電信號進行放大、衰減、積分、微分、相加、差減等;也可通過整流使其變為直流信號,或將其轉變成交流信號。處理的目的是將檢測器檢測到的信號轉變成一種可以被人讀出的信號,如可用檢流計、微安計數字顯示器、計算機顯示和記錄結果。目前,紫外可見分光光度計等光譜儀器大多數是通過專門的操作軟件在計算機中進行數據處理,可進行儀器操作、定性定量分析、記錄保存等。在安裝紫外可見分光光度計設備時候,需要去一些無強光干擾和沒有磁場干...
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要性能指標:檢出限在誤差分布遵從正態分布的條件下,由統計的觀點出發,可以對檢出限作如下的定義:檢出限是指能以適當的置信概率被檢出的組分的小量或小濃度。它是由小檢測信號值導出的。檢出限與靈敏度是密切相關的兩個量,靈敏度越高,檢出限值越低。但兩者的義是不同的。靈敏度指的是分析信號隨組分含量變化的大小,因此,它同檢測器放大倍數有直接的依賴關系,而檢出限是指分析方法可能檢出的比較低量或比較低濃,是與測定噪聲直接相聯系的,而且具有明確的統計意義。從檢出限的定義可以知道,提高測定精密度、降低噪聲,可以改善檢出限。校正曲線的線性范圍線性范圍是指從定量測定的比較...
紫外可見分光光度計是分析測試實驗室里常見的一種分析儀器,屬于光學儀器的一種,可廣泛應用于醫療衛生、化學化工、環保,機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學、農業、林業、漁業等領域中的科研、教學等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成及穩定常數的測定、反應動力學研究等。紫外可見分光光度計的工作原理1、紫外可見分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質,引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。2、紫外可見光的范圍內,對于一個特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,...
在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預熱時間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計,開機后儀器自動進入自檢(初始化)狀態,約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個環節上,很多使用者或多或少存在問題,如開機只預熱電路系統(不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等等。對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機后儀器自檢(初始化)結束后,在測定窗口上,設置所需波長值,用一個吸收池裝上純凈水置于光路上,調“0000A”后,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化后即可進行測定。對于紫外可見分光光度計,由于有雙光源(鎢燈與氘燈),為了延長燈的使用壽命,開機自檢完成后可以關掉測定...