分光光度計(jì)使用注意事項(xiàng)1、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在開(kāi)機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過(guò)程中禁止打開(kāi)樣品室蓋。2、筆式PH計(jì)測(cè)定時(shí)，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K，要盡可能及時(shí)清理干凈。3、比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過(guò)滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí)，需選用石英比色皿。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開(kāi)。一般連續(xù)光源主要用于分子吸收光譜法。中國(guó)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)賣價(jià)
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)等光譜分析儀器的主要部件：樣品容器不同的光譜儀中，樣品容器的結(jié)構(gòu)差異較大，在反射光譜儀中甚至沒(méi)有專門的樣品容器，在吸收光譜中，樣品容器也稱為吸收池。吸收池一般由光透明的材料制成。在紫外光區(qū)，采用石英材料；可見(jiàn)光區(qū)，則用硅酸鹽玻璃；紅外光區(qū)，則可根據(jù)不同的波長(zhǎng)范圍選用不同材料的晶體制成吸收池的窗口。檢測(cè)器檢測(cè)器是將一種類型的信號(hào)轉(zhuǎn)變成另一種類型的信號(hào)的器件，如在分光光度計(jì)中的光電管，是將光能轉(zhuǎn)變成電能的元件。檢測(cè)器可分為兩類，一類對(duì)光子有響應(yīng)的光檢測(cè)器，另一類為對(duì)熱產(chǎn)生響應(yīng)的熱檢測(cè)器。光檢測(cè)器有硒光電池、光電管、光電倍增管、半導(dǎo)體等。熱檢測(cè)器是吸牧輻射并根據(jù)吸收引起的熱效應(yīng)來(lái)測(cè)量人射的強(qiáng)度，包括真空熱電偶、熱釋電檢測(cè)器等。 常見(jiàn)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)比較分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后，電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。
一般來(lái)說(shuō)，紫外光分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。顧名思義，單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過(guò)對(duì)照物，然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液，就能得到吸光結(jié)果。雙光束型則是通過(guò)一個(gè)斬光輪（mirroredchopperwheel）將一束光分成兩束，分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。可以很小化光漂移（lampdrift）和減少測(cè)量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪，而是利用一種光束分光器來(lái)代替，將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度，所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望省錢購(gòu)入專門儀器定量核酸、蛋白或者細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長(zhǎng)下測(cè)量樣品。果果需要更大的靈活性，研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器，可以程序性地進(jìn)行ELISAs分析和比色分析。
分光光度計(jì)的簡(jiǎn)單原理：分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光源透過(guò)測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。核酸的定量：核酸的定量是分光光度計(jì)使用頻率比較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的比較高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如：1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測(cè)試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾后測(cè)試空白液和樣品液。然而，實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者的問(wèn)題。靈敏度越高的儀器，表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。 單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長(zhǎng)的單色光。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在有機(jī)分析中的應(yīng)用分析。利用特征吸收峰法鑒別有關(guān)物質(zhì)利用某些化合物在紫外區(qū)的特征吸收峰，可以判別物質(zhì)。如，氯霉素分子中的硝基是由它的紫外光譜確定的。在紫外區(qū)的298nm和278nm處，氯霉素會(huì)出現(xiàn)芳香硝基的特征吸收峰。五元環(huán)酮和羧基酯的紅外光譜特征吸收峰都在1740cm-1附近，因此，用紅外光譜法，難以區(qū)分它們。但是，在紫外光譜中，只有五元環(huán)酮在210nm以上有吸收，因此，可以鑒別。(2)利用紫外光譜譜圖的方法鑒別有機(jī)化合物通過(guò)對(duì)比兩個(gè)有機(jī)化合物的紫外光譜圖，可以鑒別它們。(3)利用π鍵反應(yīng)減小干擾在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用過(guò)程中，有時(shí)很強(qiáng)的吸收會(huì)引起干擾作用，如：有些稠環(huán)化合物對(duì)某些波長(zhǎng)的吸收就很強(qiáng)，這時(shí)，可采用化學(xué)，c鍵反應(yīng)去除。例如有機(jī)化合物蒽具有三個(gè)大冗鍵，在波長(zhǎng)252nm處有溝吸收，它的摩爾吸光系數(shù)會(huì)對(duì)一些在此也有吸收的化合物產(chǎn)生干擾，可讓它與丁烯二酸酐發(fā)生Diels-Alder加成反應(yīng)。這個(gè)反應(yīng)的結(jié)果，原來(lái)三個(gè)大π鍵的共軛系統(tǒng)就被破壞，原先很強(qiáng)的吸收就被減弱，干擾就會(huì)減小。 光源必須具有足夠的輸出功率和穩(wěn)定性。常見(jiàn)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)比較
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要特點(diǎn)：普遍的應(yīng)用領(lǐng)域。中國(guó)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)賣價(jià)
樣品吸光度會(huì)受到透射比的強(qiáng)烈影響，兩者之間存在A=logT這個(gè)關(guān)系式，其中A指的是樣品吸光度，T指的是透射比，當(dāng)投射比也就是T的誤差較大的時(shí)候，那么就會(huì)使樣品吸光度也就是A的誤差更加大。所以，假如透射比不夠準(zhǔn)確，那么就會(huì)影響到紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢定中的數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，透射比的準(zhǔn)確性會(huì)受到波長(zhǎng)，比色皿托盤不正，光密封不到位，光譜帶寬變化等等因素的影響，導(dǎo)致透射比的誤差超出范圍，從而導(dǎo)致儀器測(cè)量的不準(zhǔn)確性可能加大。中國(guó)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)賣價(jià)
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