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免疫熒光技術服務免疫熒光技術服務（DH0014）一、服務介紹免疫熒光技術（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進行標記，標記的抗原或標記的抗體與相應的抗體或抗原反應后，測定復合物中的熒光素，這種免疫技術稱為免疫熒光素技術。免疫熒光細胞化學分直接法、夾心法、間接法和補體法。二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0014-01免疫熒光單標記檢測咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標記檢測咨詢咨詢三、客戶提供1、細胞株或細胞爬片。注：細胞爬片不宜太密；2、熒光檢測所用的抗體3、...

基因敲除細胞構建基因敲除細胞構建服務（DH0009）一、服務介紹1、從靶點篩選到細胞株構建一站式服務。2、采用慢病毒系統構建，基因整合穩定。3、保證干擾效率大于80%（以RT-PCR檢測靶基因mRNA表達結果為依據）。4、根據您的需要可以提供經濟實惠的多克隆細胞系或者的單克隆細胞系。具體細胞系選擇請見相關介紹二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0009-1CRISPR/Cas9基因敲除咨詢咨詢DH0009-2sh細胞敲除構建咨詢咨詢DH0009-3其它三、客戶提供1.客戶需提供生長狀態良好的細胞株及其他專門的實驗材料2.干擾靶基因GeneID或mRNA序列。...

基因敲除細胞構建基因敲除細胞構建服務（DH0009）一、服務介紹1、從靶點篩選到細胞株構建一站式服務。2、采用慢病毒系統構建，基因整合穩定。3、保證干擾效率大于80%（以RT-PCR檢測靶基因mRNA表達結果為依據）。4、根據您的需要可以提供經濟實惠的多克隆細胞系或者的單克隆細胞系。具體細胞系選擇請見相關介紹二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0009-1CRISPR/Cas9基因敲除咨詢咨詢DH0009-2sh細胞敲除構建咨詢咨詢DH0009-3其它三、客戶提供1.客戶需提供生長狀態良好的細胞株及其他專門的實驗材料2.干擾靶基因GeneID或mRNA序列。...

ELISA檢測技術服務ELISA檢測技術服務（DH1006）一、服務介紹ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗原分子共價結合，此種結合不會改變抗體的免疫學特性，也不影響酶的生物學活性。此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，出現顏色反應。因此，可通過底物的顏色反應來判定有無相應的免疫反應，顏色反應的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應可通過ELISA檢測儀進行定量測定，這樣將酶化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合起來，使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測方...

3、培養箱內的濕度微生物生長需要一定的濕度條件。濕度對微生物生長的影響是通過影響微生物細胞內水分活度進而影響其新陳代謝來實現的。不同微生物的生長對濕度有一定的要求，一般來說，細菌為敏感，酵母和霉菌次之。降低濕度會使微生物的水分活度降低，從而減慢其生長速度。因此，在微生物培養的過程中，需要保持適宜的溫度和濕度，以有利于微生物的生長。培養箱內濕度的來源主要有培養基的水分散失、濕度自動調控系統以及培養箱所在的環境。因此，在使用培養箱的過程中，需要控制濕度，保持適宜的生長環境。4、培養物溢灑培養物溢灑是指含有生物危險物質的液體或固體物質意外與包裝材料分離的過程。一旦發生生物危害物品的溢出，尤其...

一.細胞復蘇1、提前準備完全培養基并預熱至37℃（可以放至在水浴或培養箱中進行預熱，需要多少預熱多少，反復預熱會導致培養基失活）；用清洗潔凈的燒杯或其他合適容器裝有適量超純水，然后放入37-38℃水浴鍋中預熱至37℃（至少需30min）；把所需耗材和其他物品放置于超凈工作臺中紫外照射滅菌；2、提前查詢所取凍存管的存放位置，把整個存儲架子提起，為了降低復溫對其它細胞的影響，可把該存儲架子放置于裝有液氮的泡沫盒中，快速（存儲架離開液氮罐的時間不要超過1分鐘，否則其余細胞容易復溫死亡，凍存管子的液氮會氣化）從液氮罐中取出凍存管并放置于裝有液氮的保溫杯中(必須用用潔凈鑷子取出凍存管，以免手)，...

所獲得的擴增子每個末端都含有部分已知DNA序列。隨后，對這些擴增子進行測序，檢測上述已知序列的相鄰區域。10、數字PCR數字PCR（DigitalPCR，dPCR）是一種核酸分子定量技術。當前核酸分子的定量有三種方法，光度法基于核酸分子的吸光度來定量；實時熒光定量PCR（RealTimePCR）基于Ct值，Ct值就是指可以檢測到熒光值對應的循環數；數字PCR是的定量技術，基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量，是一種定量的方法。主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法，將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中，每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PC...

一.細胞復蘇1、提前準備完全培養基并預熱至37℃（可以放至在水浴或培養箱中進行預熱，需要多少預熱多少，反復預熱會導致培養基失活）；用清洗潔凈的燒杯或其他合適容器裝有適量超純水，然后放入37-38℃水浴鍋中預熱至37℃（至少需30min）；把所需耗材和其他物品放置于超凈工作臺中紫外照射滅菌；2、提前查詢所取凍存管的存放位置，把整個存儲架子提起，為了降低復溫對其它細胞的影響，可把該存儲架子放置于裝有液氮的泡沫盒中，快速（存儲架離開液氮罐的時間不要超過1分鐘，否則其余細胞容易復溫死亡，凍存管子的液氮會氣化）從液氮罐中取出凍存管并放置于裝有液氮的保溫杯中(必須用用潔凈鑷子取出凍存管，以免手)，...

把培養瓶置于倒置顯微鏡下觀察，如大部分細胞變圓，立即移除胰酶消化液（如大部分細胞飄起，可不移除胰酶消化液），加入5ml預熱完全培養基，用吸管取培養液吹打瓶壁細胞，使其脫離瓶壁形成單細胞懸液，離心，小心移除上清；3、加入適量（消化前預估細胞的數量，1-2*10E6/ml凍存液）凍存液并吹打混勻，分裝至凍存管中，標記凍存細胞的名稱、冷凍日期、操作者姓名拼音簡寫，然后放入梯度降溫盒（提前復溫至室溫），置于-80℃過夜，次晨置于液氮罐中保存。注意事項1.密切觀察細胞的生長密度，當細胞密度即將達到其生長密度極限時進行換液，以便第二天進行保種；2.消化前進行凍存液配制，切勿用培養基和血清重懸細胞后...

然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質體轉染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內可裝載的藥物包括小分子化學藥物、蛋白質和多肽、核酸藥物、天然產物等。外泌體的抑制作用外泌體水平升高通常與不同類型的惡化相關，一些研究人員希望能通過降低外泌體到正常水平來防止不良預后。從這個角度出發，許多正在進行的研究旨在通過調節外泌體生成分泌的過程或通過特異性靶向其成分抑制其與靶細胞的相互作用來調節外泌體的產生。如今我們對外泌體機制和不同生理和病理條件下的功能的理解呈指數級增長，雖然目前其生物學功能還未完全解析清楚，但研究者們在許多領域均已對其進行了深入探索。外泌體不是廢物顆粒，而是細胞間通訊的關鍵介質，作為宿主細...

1、取新鮮抗凝全血（EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝血均可）或者去纖維蛋白血液，用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。2、取一支無菌離心管，先加入試劑A，再加入試劑D，使兩者形成梯度界面（試劑A：試劑D的體積比為3：2，如稀釋后的血液樣本小于5ml，則先后加入3ml試劑A和2ml試劑D；如稀釋后的血液樣本大于5ml，試劑總量與稀釋后的血液樣本量相等），兩種試劑的分層一定要清晰。3、將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方，注意保持兩液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后將血液小心的平鋪于分離液上，因為兩者的密度差異，將形成明顯的分層界面。如果樣品較多，加樣的時間較長，在離心之前...

血管生成實驗血管生成實驗（DH0011）一、服務介紹應用Matrigel模擬機體環境，上面接種**細胞，觀察血管生成情況。二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0011-1血管生成咨詢咨詢三、客戶提供1.客戶需提供生長狀態良好的細胞株及相關處理藥物2.實驗前，客戶需告知具體的細胞處理方式及詳細要求。注：若有特殊處理的樣品，請盡可能出示相關材料（具有保密性的材料除外）。四、服務流程1：細胞培養2：細胞轉染或藥物處理3：鋪Matrigel膠4：接種細胞5：觀察血管生成情況五、提交給客戶結果1、完整實驗報告2、細胞培養圖片3、血管生成圖片六、服務項目說明1.實驗周期...

細胞內吞檢測細胞內吞檢測服務（DH0013）一、服務介紹1)無菌條件下，將DiI-LDL用細胞培養基稀釋至25-50μg/ml。2)加入活細胞內，37℃培養4-5小時。3)孵育結束，吸去含有HumanDiI-LDL的培養基，并用無探針的培養基洗幾次。4)細胞固定5)熒光顯微鏡拍照二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0013細胞內吞檢測服務（DIL-Ac-LDL）咨詢咨詢三、客戶提供1.符合實驗要求的細胞藥品（包括說明書）（可代為購買）,若無任何說明，默認由本公司提供。四、提交給客戶結果1、完整實驗報告一份，包括實驗流程、數據和圖片等2、結果分析報告五、服務項...

大到動物死亡原因分析，小到灌胃操作耗時多長時間。建議反復總結出每天實驗的優缺點。做任何一個操作之前，建議提前腦海中反復模擬，準備好相關工具和試劑，避免臨用之際缺少藥的，影響實驗操作節奏和個人心情。筆者曾經灌胃操作的時候發現藥物竟然忘帶了，只好重新回實驗室準備，那真叫一個郁悶。仔細記錄每日實驗過程無論是碩士還是博士，導師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規劃首先，個人是不贊同每天2...

熒光試劑請避光保存。反應緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。實驗步驟(以24孔板，HK2貼壁細胞為例)EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養基；(b)提前將2xEdU標記培養基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養基中，獲得lxEdU溶液，其中...

細胞轉染技術服務細胞轉染實驗技術服務（DH0002）一、服務介紹細胞轉染（Transfection）是指將DNA或者RNA導入真核細胞中的過程。轉染的目的是產生重組蛋白，或特異性增強或控制轉染細胞中的基因表達。常規轉染技術可以分為兩大類，一類為瞬時轉染，一類為穩定轉染（構建穩定細胞株）。二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0002-1瞬時轉染詢價7-10DH0002-2穩定轉染（構建穩定細胞株）詢價7-10注：瞬時轉染：是指外源基因進入受體細胞后，存在于游離的載體上，不整合到細胞的染色體上，在外源基因導入細胞1-4天后收獲細胞對目的基因的表達進行檢測。特點是...

細胞鑒定服務細胞鑒定服務（DH0007）一、服務介紹為了后續實驗成功進行，我們對分離培養的細胞做一個細胞鑒定實驗。細胞鑒定實驗包括形態學鑒定、免疫組織細胞化學鑒定（免疫熒光化學鑒定）、流式細胞儀鑒定二、服務內容及價格服務編號服務內容服務價格服務周期（工作日）DH0007-1免疫組織細胞化學鑒定（免疫熒光化學鑒定）100元/片/指標7-10DH0007-2流式細胞儀鑒定200元/樣本7-10三、客戶提供1.客戶需提供生長狀態良好的細胞株及其他用于實驗材料，如藥物、質粒、病毒、相關抗體等；（若客戶需要采購其它檢測試劑盒需提前告知）2.提供的生物材料中攜帶熒光，請務必告知3.實驗前，客戶需告...

1.分子雜交與印跡技術（1）探針是經過特殊標記，能與待測單鏈核酸分子互補結合的已知核酸片段（2）印跡是將電泳分離后的大分子轉印到硝酸纖維素膜上，以便雜交的技術（3）DNA印跡：Southernblotting，用于檢測基因組DNA（4）RNA印跡：Northernblotting，主要用來檢測mRNA的表達水平（5）蛋白質印跡：Westernblotting，用于檢測蛋白質的水平（1）反應體系：單鏈DNA模板、特異性DNA引物、耐熱DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、dNTPs底物、含Mg2+的緩沖液。（2）反應步驟：變性、復性、延伸（3）逆轉錄PCR：即RT-PCR，在PCR之前先將...