Dulbecco’s改良培養基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養基的基礎上研制的，與MEM培養基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現已廣泛應用于各種細胞的培養。針對***的細胞培養應用，我們提供多種組分的DMEM改良培養基。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產，例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。不含葡萄糖的培養基可以根據研究需要，隨意調節葡萄糖的濃度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養元素，但其在溶液中不穩定，會自發降解，不含L-谷氨酰胺的培養基，可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 RPMI-1640是改進型的McCoy ‘s 5A培養基，使用碳酸氫鹽緩沖系統。醫用細胞培養基

DMEM 培養基成分復雜且精妙，除了富含氨基酸、維生素、葡萄糖、等主要成分外，還包含多種無機鹽。這些無機鹽在維持細胞內外滲透壓平衡方面發揮著關鍵作用，確保細胞不會因滲透壓異常而出現失水皺縮或吸水膨脹等情況，維持細胞正常形態。同時，無機鹽中的離子，如鈣離子、鎂離子等，參與細胞內的信號傳導過程，影響細胞的生長、分化和代謝等生理活動，為細胞的生命活動提供穩定的離子環境，與其他營養成分協同作用，共同促進細胞的健康生長。貴州RPMI-1640細胞培養基源頭直供Ham’sF-10營養混合物（Ham’sF-10Nutrient Mixture）是由Ham針對CHO細胞無血清培養設計出的一種培養基。

    培養液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養液中添加HEPES時需按以下方法調節鈉離子濃度。緩沖系統大多數細胞所需pH在-。但是，細胞培養適pH值隨培養的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數培養液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應與培養液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養箱空氣中CO2濃度設定在5％，培養液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養液中NaHCO3的加入量為。細胞培養瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養條件下，細胞培養瓶的蓋子應擰緊，以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養液呈橙黃色，堿性培養液呈深紅色。

    隨意調節葡萄糖的濃度，方便快捷。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產，例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑，對細胞無毒性作用，添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續監測培養液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養液呈黃色，而較高的PH值時使培養液呈紫色，PH值～，適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點，使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合，抑制細菌蛋白質的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。高糖 DMEM 適合生長快、粘附低的細胞，如腫瘤細胞的培養 。

    動物細胞培養（animalcellculture）就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。細胞培養基的種類有哪些？按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好，常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。2.神經元基礎培養基可為神經元生長提供基礎營養物質。IPL-41昆蟲培養基（IPL-41InsectMedium）旨在用于大規模擴增草地貪夜蛾（Spodopterafrugiperda）細胞系，也常用于通過桿狀病毒表達系統（BEVS）進行蛋白表達。IPL-41培養基是對原始IPL配方的改良，由美國農業部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發，用于大規模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎培養基中加入了胎牛血清和TPB培養基（TryptosePhosphateBroth），成功地實現了IPL-21AE。MEM α 培養基不含核苷和脫氧核苷的MEM α培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。北京醫用細胞培養基批發廠

DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型）。醫用細胞培養基

    1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富，培養效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。醫用細胞培養基

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