參考原理：血液中單個(gè)蛋白質(zhì)分子的檢測(cè)有助于識(shí)別許多新的診斷性蛋白質(zhì)標(biāo)記物。我們報(bào)告了一種同時(shí)檢測(cè)數(shù)百至數(shù)千個(gè)單獨(dú)蛋白質(zhì)分子的方法，該方法能夠檢測(cè)到非常低濃度的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)被捕獲在顯微珠上，并用酶標(biāo)記，每個(gè)顯微珠上有一個(gè)或零個(gè)酶標(biāo)記的蛋白質(zhì)。通過(guò)將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應(yīng)室，單個(gè)蛋白質(zhì)可以通過(guò)熒光想象檢測(cè)到。通過(guò)單化這些陣列中的分子，~10-20種酶可以在100μL（~10?19M）中檢測(cè)到。單個(gè)基于酶標(biāo)記的分子酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（數(shù)字ELISA)能夠檢測(cè)血清中臨床相關(guān)的蛋白質(zhì)，其濃度（<10?15M）遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)ELISA3-5。數(shù)字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術(shù)的患者血清中檢測(cè)到前列腺特異性抗原，比較低至14fmol/mL（0.4fmol）。

7）數(shù)字化高敏ELISA芯片，低成本、便捷、快速進(jìn)行微量樣本的檢測(cè)；單分子檢測(cè)數(shù)字ELISA穩(wěn)定性

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA  具有超敏的優(yōu)點(diǎn)：
檢測(cè)方法為陣列成像。陣列成像涉及對(duì)陣列中的每個(gè)孔進(jìn)行檢測(cè)以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此，開(kāi)發(fā)了一種圖像分析軟件，該軟件首先創(chuàng)建一個(gè)陣列的“掩模”，以定義孔定位和邊界進(jìn)行檢測(cè)。然后將孔掩模應(yīng)用于陣列的熒光圖像，以確定孔內(nèi)微球和酶的存在。對(duì)于陣列的熒光圖像，當(dāng)進(jìn)行多重檢測(cè)時(shí)，會(huì)生成微球群體或微球亞群的熒光強(qiáng)度直方圖。直方圖中的峰值自動(dòng)識(shí)別并用于確定微球群體。單分子檢測(cè)數(shù)字ELISA穩(wěn)定性芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA，微量檢測(cè)，使用微量樣本就能測(cè)試；

抗體篩選芯片的高效正交配對(duì)方案：抗體篩選芯片通過(guò)預(yù)埋式微陣列設(shè)計(jì)，在單通道內(nèi)集成3×7或4×5抗體點(diǎn)陣（直徑200微米），支持18-21種抗體的同步測(cè)試。以IL-6抗體篩選為例，8種捕獲抗體與8種標(biāo)記抗體在芯片上形成64種組合，通過(guò)熒光信號(hào)強(qiáng)度（信噪比>10）與交叉反應(yīng)性分析（背景信號(hào)<5%），可在1小時(shí)內(nèi)篩選出比較好配對(duì)組合（親和力KD≤1nM）。該技術(shù)耗樣量*需5μL，特別適用于珍稀樣本（如嬰幼兒血液或腦脊液）的高通量篩選。在新藥開(kāi)發(fā)中，芯片可一次性測(cè)試數(shù)百種抗體對(duì)，結(jié)合機(jī)器學(xué)習(xí)算法（如隨機(jī)森林模型），預(yù)測(cè)候選抗體的特異性與穩(wěn)定性，將傳統(tǒng)數(shù)周的篩選周期壓縮至24小時(shí)，研發(fā)成本降低70%。此外，芯片支持多條件優(yōu)化（如pH梯度、離子強(qiáng)度），為診斷試劑盒的工藝開(kāi)發(fā)提供全流程驗(yàn)證平臺(tái)。

    創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測(cè)，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M（或2飛摩爾，fM)；早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個(gè)病毒顆粒，相當(dāng)于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M（50attomolar，aM)到15×10?15M（15fM）10.嘗試開(kāi)發(fā)能夠測(cè)量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標(biāo)記復(fù)制，11,12或測(cè)量整體、結(jié)合標(biāo)記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標(biāo)記物，已將蛋白質(zhì)的檢測(cè)范圍擴(kuò)展至低飛摩爾水平；更近使用該技術(shù)的一篇報(bào)道展示了檢測(cè)到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達(dá)到的靈敏度然而，檢測(cè)蛋白質(zhì)仍然落后于核酸，如聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測(cè)到6,19。單個(gè)蛋白質(zhì)分子的分離和檢測(cè)為測(cè)量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。 芯棄疾JX-8B簡(jiǎn)易版單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品，極速檢測(cè)，檢測(cè)步驟只需要3次操作，遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于常規(guī)ELISA；

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景：適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測(cè)，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。

用DNA捕獲探針(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA）功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的說(shuō)明制備的。這些珠子與生物素化互補(bǔ)DNA的1μM（5’-生物素-CTCT）孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE緩沖液中過(guò)夜(16h）孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后，用PBS洗滌珠子三次含0.1%Tween-20的緩沖液。將珠子樣品分裝至微孔板中100μL中每孔給予400,000個(gè)微球。從微孔板孔中吸取緩沖液，將微球重懸后與不同濃度的ofSβG孵育。 多指標(biāo)檢測(cè) POCT 芯片采用單分子捕獲技術(shù)，15-20 分鐘出結(jié)果，靈敏度達(dá) pg/ml 級(jí)別。微型數(shù)字ELISA特點(diǎn)

芯棄疾芯片可檢測(cè)血清中 NfL 等較低豐度神經(jīng)因子，助力阿爾茨海默癥早期篩查。單分子檢測(cè)數(shù)字ELISA穩(wěn)定性

    神經(jīng)退行性疾病的超早期診斷突破：?jiǎn)畏肿有酒ㄟ^(guò)檢測(cè)血清中**豐度生物標(biāo)志物（如NfL濃度<1pg/mL、pTau181低至），可在阿爾茨海默癥（AD）臨床癥狀出現(xiàn)前16年發(fā)現(xiàn)病理異常。臨床研究顯示，AD患者血清NfL水平較健康對(duì)照組升高3-5倍（p<），且與腦脊液檢測(cè)結(jié)果高度相關(guān)（r=）。結(jié)合Aβ42/Aβ40比值（閾值<）與Tau蛋白磷酸化位點(diǎn)分析，芯片可精細(xì)區(qū)分AD、路易體癡呆及額顳葉癡呆，診斷特異性達(dá)92%。在藥物研發(fā)中，該技術(shù)用于追蹤抗Aβ單抗***的生物標(biāo)志物動(dòng)態(tài)變化（如Aβ42***率每月提升15%），為劑量調(diào)整與療效評(píng)估提供量化依據(jù)。此外，芯片支持腦脊液替代檢測(cè)，通過(guò)血清分析即可實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)監(jiān)測(cè)，患者依從性提升50%。 單分子檢測(cè)數(shù)字ELISA穩(wěn)定性