研究細胞內信號通路的動態(tài)變化,需要能在細胞裂解液甚至活細胞背景下進行快速、多通路的分析。均相化學發(fā)光技術完美契合這一需求。例如,使用基于Alpha或類似技術的磷酸化特異性免疫檢測,可以在同一塊板中,從細胞裂解液中直接定量多種信號蛋白(如Akt、ERK、STAT)在不同刺激條件下的磷酸化水平。整個過程無需Western Blot的凝膠電泳、轉膜和繁瑣的封閉孵育洗滌步驟,通量提高數百倍,且能實現精確定量。此外,基于化學發(fā)光的報告基因檢測(如熒光素酶)也被普遍用于監(jiān)測特定信號通路(如Wnt、Hedgehog、NF-κB)的轉錄活性,用于功能性篩選和機理研究。均相化學發(fā)光在體外診斷領域的應用范圍有多廣?吉林浦光生物均相發(fā)光免疫分析

化學發(fā)光共振能量轉移(CRET)是另一種重要的均相信號產生機制。它本質上是一種無需外部光激發(fā)的內源性FRET。在CRET中,供體是化學發(fā)光反應產生的激發(fā)態(tài)分子(如氧化的魯米諾或吖啶酯),其發(fā)射的光子能量直接傳遞給鄰近的熒光受體(如熒光染料、量子點或納米材料),促使受體發(fā)射出波長紅移的熒光。在均相檢測設計中,可將化學發(fā)光分子與受體分別標記在相互作用的生物分子對上。只有當目標分子存在并促使兩者結合時,供體與受體才能充分靠近,發(fā)生有效的CRET,產生特征性的受體熒光信號。通過檢測受體熒光,可以避免直接化學發(fā)光可能存在的背景干擾,并獲得更佳的光譜分辨能力,利于多重檢測。福建浦光生物均相發(fā)光解決方案均相化學發(fā)光,國家重點實驗室檢測平臺,領航醫(yī)療新時代!

均相發(fā)光是一種先進的生物化學檢測技術,其關鍵特征在于整個檢測反應過程均在均一的液相中進行,無需任何固相分離步驟(如洗滌、離心)。 它通過巧妙的設計,將待測物的特異性識別事件(如抗原-抗體結合、酶-底物反應)直接轉化為可檢測的光信號。 實現這一目標的關鍵在于依賴能量轉移、空間位阻改變或化學環(huán)境變化等機制,使信號分子(供體)與淬滅分子(受體)或發(fā)光底物在結合事件發(fā)生前后,其相互作用效率發(fā)生明顯改變,從而導致發(fā)光信號的增強或猝滅。與傳統(tǒng)的異相免疫分析(如ELISA)相比,均相發(fā)光技術具有操作簡便、通量高、易于自動化、試劑消耗少、檢測速度快等突出優(yōu)點,極大地推動了高通量藥物篩選、臨床診斷和基礎生命科學研究的發(fā)展。
均相化學發(fā)光技術因其超高的通量、靈敏度和易于自動化的特性,已成為現代藥物發(fā)現高通量篩選(HTS)的支柱技術。在靶點導向的篩選中,它廣泛應用于:激酶/磷酸酶抑制劑篩選(通過檢測磷酸化底物的量)、GPCR功能分析(檢測cAMP、IP3或β-arrestin招募)、核受體轉錄活性篩選(報告基因檢測)、蛋白-蛋白相互作用抑制劑篩選(如使用Alpha技術)、以及酶活性分析(蛋白酶、去乙酰化酶等)。其“混合-讀數”的模式允許在1536孔甚至更高密度板中進行超大規(guī)模化合物庫(數十萬至上百萬)的篩選,每天可產生海量數據,極大加速了先導化合物的發(fā)現進程。均相化學發(fā)光的檢測速度如何,能否滿足快速診斷需求?

在免疫學和學研究,常需同時監(jiān)測多個細胞因子或信號蛋白的磷酸化狀態(tài)。基于微珠的多重均相發(fā)光檢測系統(tǒng)(如Luminex xMAP技術結合化學發(fā)光檢測)應運而生。該系統(tǒng)使用不同顏色編碼的微球作為固相載體,每種微球包被一種特異性捕獲抗體。樣本中的多種靶標被各自捕獲后,再用生物素化檢測抗體和鏈霉親和素-熒光/發(fā)光報告分子進行檢測。雖然微球是固相,但整個反應在懸浮液中進行,讀數前無需洗滌,本質上也是一種高效的“液相”或“懸浮芯片”式多重均相檢測。浦光生物均相化學發(fā)光新技術!遼寧診斷試劑均相發(fā)光技術
體外診斷行業(yè)新星,均相化學發(fā)光,助力企業(yè)快速發(fā)展!吉林浦光生物均相發(fā)光免疫分析
在傳染病診斷領域,均相化學發(fā)光技術主要用于開發(fā)高靈敏的抗原或抗體檢測方法。例如,針對病毒抗原,可以設計雙抗體夾心法的Alpha檢測,實現快速、高靈敏的定量。在病毒學基礎研究中,其應用更為普遍:假病毒中和試驗(檢測熒光素酶報告基因信號以評估抗體中和能力)、病毒進入抑制篩選、病毒復制周期關鍵酶(如蛋白酶、聚合酶)抑制劑篩選等。特別是在COVID-19大流行期間,基于均相化學發(fā)光原理的高通量中和抗體檢測平臺,為疫苗評價和康復者血漿篩查提供了關鍵工具。吉林浦光生物均相發(fā)光免疫分析