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福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

來源: 發布時間:2024-05-24

如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子,現在有了Genovis的一些新產品(IgA酶,IgM酶),其他的模式和分子形式(IdeS高通量的產品形式)來測定和監測許多不同的CQA,Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現的瓶頸。 生產大量的樣品當然很好,但如果分析團隊不能足夠快地處理它們,那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法,當然這些方法要快速,而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的,這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。該酶對具有突變鉸鏈區域的抗體(如 LALA 突變)具有活性。福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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一些應用(如結合研究)具有高度靈敏度,因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段。因此,Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供,可快速輕松地生成均質 F(ab')2 和 Fc/2 片段。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR (IdeS),用于制備來自多種 IgG 的 F(ab')2 和 Fc 片段(對于兔 IgG,請咨詢),而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進行處理 。 為了生成和純化完整的 F(ab')2 和 Fc/2 片段,使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒處理曲妥珠單抗,并通過 SDS-page 進行分析。首先,在室溫下在FabRICATOR固定化離心柱上消化抗體15分鐘,然后進行短離心步驟。在 CaptureSelect ? 離心柱上純化 F(ab')2 片段,并通過降低 pH 值,然后立即調整回中性 pH 值,一步洗脫結合的 Fc 片段。使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒從酶切到收集片段的過程大約需要 1 小時山東FabRICATOR ZIdeS蛋白酶蛋白組學小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,不被 FabRICATOR Z 消化。

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與IdeS不同,在蛋白質zhiliao藥物的質量控制過程中,詳細分析和識別質量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法,這包括確認連接蛋白的質量以及蛋白質接頭的質量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質結構域來幫助這種質量控制。然而,連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點,導致連接子內多個位點同時水解。消化的產物通常由連接蛋白的幾種變體組成,并保留不同程度的連接子。雖然觀察到的異質性通常不會對蛋白質亞基的詳細表征產生負面影響,但有助于直接表征連接子,但有時需要更均勻的消化產物來詳細分析單個蛋白質結構域。

Genovis是一家瑞典生物技術公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具,主要用于生物制藥行業和學術界。我們在全球范圍內提供創新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發、生產和質量控制。您可以在我們的網站上“Application頁面”獲得更多應用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯系我們。Genovis已經測試了 PBS 和 150 mM 醋酸銨,并且也適用于FabRICATOR HPLC。

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與IdeS不同,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區域。為了分別研究肽和 Fc 區域,從而鑒定結構域特異性 PTM,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進行連接子消化后,肽從Fc區域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點,這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外,還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化,但一式三份的酶解在獲得的不同Fc/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。這正是您使用FabRICATOR(IdeS蛋白酶)可以得到的。海南FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學

可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的 F(ab')2 和 Fc 片段。福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA,因為它會影響療效、和免疫原性。因此,需要從早期開發、工藝開發到質量控制和批量放行的整個過程對Fc聚糖譜進行監測。傳統的分析方法基于對游離的聚糖進行熒光標記,然后通過HILIC-HPLC或CE進行分析,這需要多步驟的樣品制備方案,這需要大量的時間和資源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,然后使用LC-MS進行中級分析,為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的替代方法。如上所示,它很容易實現自動化,以提高通量并降低處理錯誤的風險。福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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