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青海GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

來源: 發布時間:2024-05-22

Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對處理兔IgG感興趣,請聯系Genovis團隊,我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質量控制應用。 QC方法需要執行簡單,易于訓練,高度可重復,數據易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因為它適用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進行QC工作的客戶將能夠在未來的產品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC(基于 IgG)消化成其亞基,用于表征這類復雜的藥物。青海GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

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Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨特的酶,可在鉸鏈區域下方的特定位點消化IgG,產生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內消化,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,因此保留了免疫反應性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長的反應時間進行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發,用于需要高標準和一致性的生物技術應用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法。了解有關山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。北京IdeS蛋白酶抗體酶切剩下一個連接子殘基(甘氨酸殘基),這有助于識別位于Fc區域的修飾。

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Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對IgG進行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動化使生物反應器的在線監測應用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設置的一部分,將反應器直接耦合到MS。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間、樣品處理時間并提高了通量。

上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學院及生物醫藥產業界人士,于2018年1月共同創立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相關法規要求,如cGMP規范、ISO13485質量管理體系認證等,致力于為診斷領域如分子診斷及病原微生物檢測研發等,藥物研發領域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規、高質量物料及專業服務,以期與客戶共同協作,加快研發及生產進度,為客戶提供更多價值。可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgA1,產生完整且均質的 Fab 和 Fc 片段。

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Genovis的FabRICATOR MagIC自動樣品制備可用于分析和監測不同的CQA。mAb在生產或儲存過程中的氧化就是這樣一種CQA,可能會影響zhiliao產品的質量。為了展示FabRICATOR MagIC如何解決這個問題,對6種mAb的混合物進行強制降解(室溫下3個月),并通過反相LC-MS進行分析。當在完整水平上分析mAb時,可以檢測到mAb5豐度的顯著差異,同時出現許多新的峰。然而,無法獲得可靠的質量數據。使用FabRICATOR MagIC,mAb5變化的來源在Fab區域內。隨后還原為 Fc/2、LC 和 Fd' 片段,可以識別差異是由于 mAb5 Fd' 片段上的色氨酸氧化,通過形成氧代內酯 (+14 Da) 和二氧代內酯 (+30 Da) 以及 mAb5 LC (-18 Da) 的琥珀酰亞胺化來揭示。此外,還可檢測到mAb3輕鏈的異構化。該示例說明了FabRICATOR MagIC在mAb中級分析中的強大功能,它創建的片段足夠小,可以精確定位特定的修飾,而無需耗時耗費資源的肽圖分析,所有這些都以相對較少的手動操作時間快速完成。可用于如單價結合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化等。江西GingisKHANIdeS蛋白酶蛋白組學

Genovis的FabRICATOR MagIC可用于自動分析和監測不同的CQA。青海GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

與肽圖譜相比,根據Genovis科學家的經驗,尤其是對于像抗體這樣的分子,許多人在常規實驗中做了太多的肽圖譜,而中級水平(Middle-level)的方法可以很好地工作。中級方法(IdeS酶切抗體)需要更少的實際操作步驟和較少的示例處理,所有這些都意味著過程中出錯的事情更少。我們的許多酶可以作為平臺方法,同樣的方法適用于絕大多數的抗體,這不是肽圖的情況下,可能需要優化整個樣品制備,LC分離,質譜設置和數據分析的每個不同的抗體分析。這些變化可能是很小的,但沒有一種適用于所有肽圖的方法。由于分析和數據分析的簡單性,中級方法非常適合自動化和高通量的工作流程。肽圖當然可以自動用于樣品制備,但高通量肽圖生成大量數據,仍然需要徹底分析。事實上,肽圖譜是一個多步驟的過程,每一個步驟都可能破壞方法,并可能導致破壞蛋白質的人工制品,很難交叉訓練給非專業人員。中級水平的方法很容易交叉訓練,我們的方法在質量控制實驗室中被成功地使用。肽圖譜是一種用于修飾分析和氨基酸確認的方法,但一旦完成了這一工作,我相信使用中級分析可以成功地更有效地完成抗體樣本的大部分工作。青海GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

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