Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶，它對許多不同的物種和IgG亞類都有活性，包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個位點進行消化，生成F(ab’)2和Fc/2子基，可以進一步還原生成Fd’，輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR（IdeS）通過蛋白-蛋白相互作用與目標抗體工作，這說明了它的高特異性。事實上，它在單個位點消化意味著使用FabRICATOR時沒有過度消化的風險，其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺方法應用于許多不同的抗體。FabRICATOR（IdeS）不需要還原條件來獲得良好活性，也不需要任何額外的輔助因子，它將在不同生理緩沖中發揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解，您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應用。孵育時間為過夜（16-18小時），并且由于酶的特異性，沒有過度消化的風險。海南FabULOUSIdeS蛋白酶

如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子，現在有了Genovis的一些新產品（IgA酶，IgM酶），其他的模式和分子形式（IdeS高通量的產品形式）來測定和監測許多不同的CQA，Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現的瓶頸。 生產大量的樣品當然很好，但如果分析團隊不能足夠快地處理它們，那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法，當然這些方法要快速，而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的，這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。安徽FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶IgASAP Sub1 可水解分泌物和血清 IgA1。

與IdeS不同，度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 （GLP-1） 分子組成，它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區域。為了分別研究肽和 Fc 區域，從而鑒定結構域特異性 PTM，用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性，使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖，并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明，使用GlySERIAS進行連接子消化后，肽從Fc區域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點，這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體，其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外，還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化，但一式三份的酶解在獲得的不同Fc/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。

Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR（IdeS）酶，是在鉸鏈下方對IgG進行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產生均質的F（ab'）2和Fc片段。酶解后，可以使用反相HPLC、質譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動化使生物反應器的在線監測應用成為可能，例如，作為2D-LC-MS設置的一部分，將反應器直接耦合到MS。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間、樣品處理時間并提高了通量。可消化精氨酸殘基的 C 末端蛋白質，包括難以與其他酶消化的 Arg-Pro 鍵。

Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1，并在兩小時內生成均質的Fab和Fc片段（Genovis的IdeS在鉸鏈區下方的單個位點進行消化）。生成的片段可用于結晶和高階結構（HOS）的NMR研究、結合研究等。突變的鉸鏈區域是zhiliao性候選抗體的常見修飾，以降低效應器功能。這些突變可能會影響具有高底物特異性的酶的抗體消化效率。例如，高度特異性的FabRICATOR（IdeS）消化效率對含有常見LALA突變的抗體產生負面影響。FabDELLO作用于人IgG1鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基，能夠對具有突變鉸鏈區域的抗體進行流行的中級LC-MS分析。例如，用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab，在下鉸鏈區域具有LALA突變，并通過反相LC-MS進行分析。消化產生均勻的Fab和Fc片段。用20mMDTT還原片段，用于中級LC-MS分析，發現產生了均相的Fc/2、輕鏈（LC）和Fd片段。用FabDELLO消化后觀察到的定義峰顯示出均勻的片段生成和酶的穩健性能。降低樣品處理錯誤的風險，同時提高通量。山西GingisREXIdeS蛋白酶抗體酶切

為了分別研究度拉糖肽的肽和 Fc 區域，從而鑒定結構域特異性 PTM。海南FabULOUSIdeS蛋白酶

樣品制備的條件可能會在樣品中誘發偽影，因此需要避免高溫和堿性pH值進行質譜分析。如果可能的話，避免多個步驟并在一鍋反應中進行消化和還原也可能是有益的。與IdeS不同，為了探索Genovis的GingisREX對離液劑和去液劑的穩定性和耐受性，在一系列試劑中測試了酶活性，并使用底物測定進行了評估。數據顯示，GingisREX在6M時耐受尿素，吐溫高達1%，但活性在0.1%時受到SDC的負面影響。該酶在 pH 值范圍為 5.0 至 9.0 時顯示出活性，在 pH 值為 6.5-8.0 之間。綜上所述，GingisREX可用于一鍋反應，以同時消化和變性6M尿素。與Genovis的IdeS不同，雙特異性 T 細胞接合器 （BiTE） 分子是一種融合蛋白療法，其中兩個 scFv 融合，形成一個雙特異性分子，其中一個 scFv 靶向細胞毒性 T 細胞，另一個靶向Ai癥抗原。該蛋白質由四個蛋白質結構域組成，兩個 scFv 均由 VL 和 VH 區域組成，總共由三個柔性 GS 連接子連接。這種蛋白質的大尺寸（54 kDa）可能對通過完整質譜法進行產品質量監測構成挑戰，因為標準MS儀器可能無法提供蛋白質的單同位素分辨率。海南FabULOUSIdeS蛋白酶