原子熒光分析法。氣態(tài)自由原子吸收特征波長的輻射后,原子的外層電子從基或低能態(tài)躍遷到高能態(tài),約經(jīng)10-8S,又躍遷至基態(tài)或低能態(tài),同時發(fā)射出與原激發(fā)長相同或不同的輻射,稱為原子熒光。波長在紫外和可見光區(qū)。在與激發(fā)光源成一定角度(通常為90。)的方向測量熒光的強度,可以進行定量分析。原子吸收光譜分析法。利用待測元素氣態(tài)原子對共振線的吸收進行定量測定的方法。其吸收機理是對共振線的吸收導致原子的外層電子能級躍遷,所吸收波長在紫外、可見和近紅外區(qū)。紫外分光光度分析法此法是利用溶液中分子吸收紫外光而產(chǎn)生躍遷所記錄的吸收光譜圖,可進行化合物結(jié)構分析,根據(jù)比較大吸收波長強度變化可進行定量分析。可見分光光度分析法此法是利用溶液中分子吸收可見光產(chǎn)生躍遷所記錄的吸收光譜圖,可進行化合物結(jié)構分析,根據(jù)比較大吸收波長強度變化可進行定量分析。 紫外可見分光光度計主要特點:普遍的應用領域。高效紫外可見分光光度計儀器
紫外可見分光光度計的光度噪聲直接影響儀器的信噪比,它是限制分析檢測濃度下限的主要因素。目前,各國紫外可見分光光度計的生產(chǎn)廠商,給出的整機光度噪聲都是指儀器在500nm處的光度噪聲(稱之為整機的光度噪聲),主要用于比較不同儀器的優(yōu)劣。而紫外可見分光光度計的使用者往往要在不同波長上使用,特別要在紫外區(qū)使用。所以,只給出500nm處的整機光度噪聲,不能滿足使用者的要求。因此,提出了基線平直度的概念。紫外可見分光光度計的基線平直度是指每個波長上的光度噪聲,它是用戶比較關心的技術指標之一。它是紫外可見分光光度計各個波長上主要分析誤差的來源之一。它決定紫外可見分光光度計在各個波長下的分析檢測濃度的下限。但是很可惜,目前很多儀器制造者、使用者都還沒有認識到或還沒有重視基線平直度這個技術指標。高效紫外可見分光光度計儀器一般連續(xù)光源主要用于分子吸收光譜法。
分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長下測量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導體研究需要的光譜范圍。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是這樣的儀器。一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
樣品吸光度會受到透射比的強烈影響,兩者之間存在A=logT這個關系式,其中A指的是樣品吸光度,T指的是透射比,當投射比也就是T的誤差較大的時候,那么就會使樣品吸光度也就是A的誤差更加大。所以,假如透射比不夠準確,那么就會影響到紫外可見分光光度計檢定中的數(shù)據(jù)的準確性,透射比的準確性會受到波長,比色皿托盤不正,光密封不到位,光譜帶寬變化等等因素的影響,導致透射比的誤差超出范圍,從而導致儀器測量的不準確性可能加大。紫外可見分光光度計的注意事項:比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。
比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用,加入超出了這個圍就應考慮其對測試結(jié)果的影響。怎么維護紫外可見分光光度計:應先開總電源,再開分開關及各選擇鍵。生產(chǎn)紫外可見分光光度計多少錢
在安裝紫外可見分光光度計設備時候,需要去一些無強光干擾和沒有磁場干擾的室內(nèi)進行安裝。高效紫外可見分光光度計儀器
紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:光源光譜分析中,光源是提供足夠的能量使試樣蒸發(fā)、原子化、激發(fā),產(chǎn)生光譜。光源必須具有足夠的輸出功率和穩(wěn)定性。由于光源輻射功率的波動與電源功率的變化成指數(shù)關系,因此往往需用穩(wěn)壓電源以保證穩(wěn)定或者用參比光束的方法來減少光源輸出對測定所產(chǎn)生的影響。光源為連續(xù)光源和線光源等。一般連續(xù)光源主要用于分子吸收光譜法;線光源用于熒光、原子吸收和Raman光譜法。單色器單色器的主要作用是將復合光分解成單色光或有一定寬度的譜帶。單色器由入射狹縫和出射狹縫、準直鏡以及色散元件,如棱鏡或光柵等組成。高效紫外可見分光光度計儀器
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