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分析檢測紫外可見分光光度計

來源: 發(fā)布時間:2022-04-02

      物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。 怎么維護紫外可見分光光度計:光譜儀器應經(jīng)常保持清潔,有灰塵進入光譜儀儀器內(nèi)部。分析檢測紫外可見分光光度計

      吸光度測量誤差在透過率過大或過小時都會變大,為了滿足定量分析的誤差要求(<5%),在定量分析時要求吸光度應在一定的范圍內(nèi),這個范圍的具體值與儀器性能有關,主要是與紫外可見分光光度計檢測系統(tǒng)噪聲大小有關,但通常都在0.1~1.0范圍內(nèi),如果儀器的檔次更低,則范圍更窄。根據(jù)朗伯比爾定律,影響吸光度大小的因素主要是樣品摩爾吸光系數(shù),濃度和比色皿光程。實驗中吸光度過大的樣品可通過稀釋樣品使吸光度到所需范圍內(nèi)。如果樣品不能稀釋,可以改用光程較小的比色皿減小吸光度。吸光度過小的樣品可使用光程較大的比色皿以增大吸光度。元素紫外可見分光光度計現(xiàn)貨熱檢測器是吸牧輻射并根據(jù)吸收引起的熱效應來測量人射的強度,包括真空熱電偶、熱釋電檢測器等。

    一般來說,紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進行測量。一束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。雙光束型則是通過一個斬光輪(mirroredchopperwheel)將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品。可以很小化光漂移(lampdrift)和減少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處。分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長下測量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。

     在分光元器件方面,經(jīng)歷了棱鏡、機刻光柵和全息光柵的過程,商品化的全息閃耀光柵已迅速取代一般刻劃光柵。在儀器控制方面,隨著單片機、微處理器的出現(xiàn)以及軟硬件技術的結(jié)合,從早期的人工控制進步到了自動控制。在顯示、記錄與繪圖方面,早期采用表頭(電位計)指示、繪圖儀繪圖,后來用數(shù)字電壓表數(shù)字顯示,如今更多地采用液晶屏幕或計算機屏幕顯示。在檢測器方面,早期使用光電池、光電管,后來更普遍地使用光電倍增管甚至光電二極管陣列。陣列型檢測器和凹面光柵的聯(lián)合應用,使儀器的測量速度發(fā)生了質(zhì)的飛躍。性范圍是指從定量測定的較低濃度擴展到校正曲保持線性濃度的范圍。

紫外可見分光光度計等光譜分析儀器的主要部件:數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)據(jù)處理系統(tǒng):主要有計算機、數(shù)據(jù)通信部件和儀器控制及數(shù)據(jù)處理軟件組成。通常由檢測器將光信號轉(zhuǎn)換成電信號后,還須經(jīng)過一定的信號處理器處理,如對電信號進行放大、衰減、積分、微分、相加、差減等;也可通過整流使其變?yōu)橹绷餍盘枺驅(qū)⑵滢D(zhuǎn)變成交流信號。處理的目的是將檢測器檢測到的信號轉(zhuǎn)變成一種可以被人讀出的信號,如可用檢流計、微安計數(shù)字顯示器、計算機顯示和記錄結(jié)果。目前,紫外可見分光光度計等光譜儀器大多數(shù)是通過專門的操作軟件在計算機中進行數(shù)據(jù)處理,可進行儀器操作、定性定量分析、記錄保存等。紫外可見分光光度計的日常維護:溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。可靠紫外可見分光光度計銷售廠家

紫外可見分光光度計的注意事項:開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。分析檢測紫外可見分光光度計

      吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗2~3遍,潤洗前是否要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區(qū)別對待。如果初次用干的吸收池裝待測液(特別是有色溶液)時,從維護保養(yǎng)吸收池的角度講,為減小其干玻面對顏色的吸附能力,便于用后吸收池的清洗,建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗2~3遍;若后再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液(如從小到大測定標準系列溶液的吸光度)時,可直接用待裝溶液潤洗2~3遍即可。標準曲線法定量時,如果是先測定標準系列溶液的吸光度,當測到樣品溶液時,由于測定的樣品溶液濃度比***一個標準溶液的濃度低或不可知時,建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗2~3遍。分析檢測紫外可見分光光度計

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