為了保障在190~1100nm區域內的高信噪比,目前的儀器均采用兩只光源燈互補使用,即在紫外區采用氘燈,而在可見區使用鎢燈,兩只燈的選擇采用旋轉光源鏡來切換。眾所周知,紫外可見分光光度計的光源部需要經常更換光源燈(鎢燈或氘燈),一般來說這種工作均由儀器廠家的工程師來進行;如果儀器用戶自己可以掌握這種更換和調整技術,既能節約等待時間又能節省維修費用,可謂一舉兩得。雖然有些用戶也曾經自行嘗試過這種工作,但往往效果不太理想,究其原因則是沒有掌握要領,他們將這種更換光源燈的工作看做與更換室內照明燈泡的性質一樣,認為只要換上的光源燈被亮即萬事大吉;為此,我談談這方面的調整要領。一般簡易型分光光度計的光源室**設計了一支鎢燈來涵蓋整個波長區域的使用,由于鎢燈的能量在紫外區很弱,因此、此類儀器在紫外區的測量信號的噪聲較大。也有**的紫外分光光度計,同理、光源燈就改用一支氘燈了。熱檢測器是吸牧輻射并根據吸收引起的熱效應來測量人射的強度,包括真空熱電偶、熱釋電檢測器等。紫外可見分光光度計
紫外可見分光光度計的主要類型:單光束分光光度計。單光束是指從光源今發出的光,經過單色器等—系列光學元件,通過吸收池,結尾照在檢測器上時,始終為一束光。它只官一束單色光(光束只能交替通過參比溶液、樣品溶液),一只比色皿,一只光電轉換器。工作時,一條光路,先通過多比溶液,再通過試樣溶液進行光強度的測旦。單光束分光光度計的特點是結構簡單、價格低,主要適用于做定量分析,測量結果受電源的波動影響較大,容易給測量結果帶來較大的誤差。所以,它們在位灼上受到限制。一般來講,要求較高的制藥行業、質量檢驗行加等不適宜使用單光束紫外可見分光光度計。常用紫外可見分光光度計在選擇紫外可見分光光度計之前,需要了解儀器的基礎構架,有哪些地方是消耗品,有想哪些需要維修保養。
紫外-可見吸收光譜為什么有些化合物是有色的,而另一些化合物卻沒有?共軛與顏色有什么關系?我們必須對光譜中可見光部分和附近的不同波長處的光吸收進行精確測量。商業光譜儀可對光譜中近紫外和可見部分光吸收進行精確測量。可見光區域的光子能量為36-72kcal/mol,近紫外線區域(至200nm)的能量范圍擴展至143kcal/mole。波長小于200nm的紫外線輻射難以處理,因此很少用作結構分析的常規工具。當一束光照射物質時,上述能量會激發分子電子至更高能量的軌道。下圖顯示了有機分子中發生的各種電子激發的示意圖,其包含六個躍遷。通常,只有三個低能量躍遷是通過200至800nm光的能量實現的,也就是說,能夠吸收200-800nm區域光的分子應具有π電子系統和具有未成對電子對的雜原子。這種吸光基團稱為生色團。當樣品分子暴露于具有與分子內可能的電子躍遷相匹配能量的光時,電子受光子激發從高的占據分子軌道(HOMO)躍遷到低的未占據分子軌道(LUMO),一些光能將被吸收,所產生的物質稱為激發態物質。光譜儀記錄吸收波長以及每個波長的吸收程度,所得光譜用吸光度(A)與波長的關系圖表示。吸光度通常在0(無吸收)到2(99%吸收)的范圍內。
在現在生產中有非常多的高新技術產品在協助生產,像紫外可見分光光度計這樣的產品也是在現在生產中起到了非常大的作用,對于現在非常多的人來說,不管是在生產上還是在日常生活中,都是非常需要有這種工具的參與。因為在現在生活中對于相關物質上的純度上的檢測或者是物質成分上的檢測都是需要有它的相關參與。分光光度計在現在生產使用上還是需要在細節上重視保養。注意保持儀器的清潔,無論是使用前使用后都應該清理好儀器。而且儀器的存放環境也要干燥整潔。其次就是需要重視在使用之前的檢查,許多人在使用之前都沒有進行檢查,就比較可能會造成儀器因為使用不當而損壞。在長期不用的情況下,也應當注意定期對儀器進行保養工作,確保儀器能夠正常工作以及延長儀器使用壽命。在水質的常規監測中,紫外可見分光光度法占有較大的比重,待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大。
紫外-可見分光光度計的類型很多,根據儀器結構可分為單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計三種,其中單光束分光光度計和雙光束分光光度計屬于單波長分光光度計。1.單光束分光光度計從光源發出的光經單色器分光后得到一束單色光,通過吸收池后,然后照射在檢測器上始終為一束光,如下圖所示。該類型的分光光度計結構簡單、價格便宜,但由于其雜散光、光源波動等影響很大,所以準確度較差。雙光束分光光度計從光源發出的復合光經單色器分光后的單色光被反射鏡(切光器)分為強度相等的兩束光,分別通過參比溶液和樣品溶液,如下圖所示。由于兩束光同時通過參比溶液和樣品溶液,因此能夠自動消除光源強度變化所引起的誤差。雙光束分光光度計一般能自動記錄吸收光譜曲線,其靈敏度較好,但結構較復雜、價格較貴。通常我們所理解的單色光,只是存于理想狀態下,實際上得到的“單色光”,是帶有一定寬度和波長范圍的譜帶。民用紫外可見分光光度計設備
紫外-可見分光光度法是利用某些物質的分子吸收200--800nm光譜區的輻射來進行分析測定的方法。紫外可見分光光度計
紫外可見分光光度計是目前世界上歷史較悠久、使用較多、覆蓋面較廣的分析儀器之一。它已在生命科學、材料科學、環境科學、農業科學、計量科學、食品科學、地質科學、石油科學、醫療衛生、鋼鐵冶金、化學化工等各個領域的科研、生產、教學等工作中得到了非常普遍的應用。它可作定量分析(較主要的應用)、純度分析、參與結構分析(結構簡單的樣品可直接作結構分析)、參與定性分析(結構簡單的樣品可直接作定性分析);特別在定量分析和純度檢查方面,在許多領域更是必備的分析儀器。例如,制藥、食品、農業、化學化工、計量等行業中的產品質量控制,各級藥檢系統的產品質量檢測等。它是集光學、機械學、電子學和計算機四位一體的、技術密集的高科技產品。紫外可見分光光度計在科技領域的作用非常大,并且還將越來越大;凡是有分析工作的地方,幾乎都可能有紫外可見分光光度計和超微量分光光度計。可以說,它在“農、輕、重、海、陸、空、吃、穿、用”各個領域的各個行業中,已經是無所不在、無所不有的分析儀器。紫外可見分光光度計