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均相發(fā)光技術(shù)通過其“免分離”的關(guān)鍵設(shè)計理念，徹底變革了生物檢測的模式。從基礎(chǔ)的蛋白互作、酶活性分析，到復雜的細胞信號通路研究、高通量藥物篩選，再到臨床診斷和生物工藝監(jiān)控，其足跡已遍布生命科學和醫(yī)學的各個角落。以FRET、TR-FRET、Alpha、BRET等為...

在臨床診斷和生物研究中，經(jīng)常需要同時檢測一個樣本中的多個指標。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實現(xiàn)多重分析。空間編碼：在不同的微孔或區(qū)域進行不同檢測。光譜編碼：使用發(fā)射不同波長熒光的多種受體（如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體），通過檢測不同波長通道的信號來區(qū)分不...

血小板制劑在體外儲存期間會發(fā)生“儲存損傷”，影響其輸注后的存活率和功能。這種損傷伴隨膜糖蛋白的改變：CD42b（GP Ibα）因蛋白水解或內(nèi)化而表達下降，影響血小板的粘附能力;GP IIb/IIIa可能發(fā)生構(gòu)象改變;CD62P則因α顆粒自發(fā)釋放而表達增加，提示...

激酶是重要的藥物靶點，其活性檢測是藥物篩選的關(guān)鍵。均相發(fā)光技術(shù)，尤其是TR-FRET和Alpha技術(shù)，為此提供了理想平臺。以TR-FRET為例：將待測激酶、底物肽、ATP與待篩選化合物共同孵育。體系中包含兩種抗體，一種針對磷酸化底物（帶供體標記），另一種針對底...

CD42a 是血小板糖蛋白Ib-IX-V復合物中的一個重要成員。 浦光生物將其納入血小板檢測套餐，凸顯了其在診斷全面性上的考量。 該復合物是血管性血友病因子（vWF）的主要受體，介導血小板與受損血管內(nèi)皮的初始粘附。 針對CD42a的化學發(fā)光檢測，能夠揭示該復合...

在嚴重炎癥和敗血癥過程中，血小板被LPS、病原體相關(guān)分子模式（PAMPs）或宿主損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）直接或間接活化。這導致GP IIb/IIIa活化（PAC-1結(jié)合增加）、α顆粒釋放（CD62P表達升高）和血小板-白細胞聚集。活化的血小板通過CD62...

患者反復輸注血小板后，可能因同種免疫產(chǎn)生針對供者血小板膜糖蛋白（主要是HPA和HLA抗原）的抗體，導致輸入的血小板被快速破壞，即PTR。流式細胞術(shù)是診斷PTR的重要工具。通過使用一組針對特定HPA（如HPA-1a， -1b， -2a， -2b， -3a， -3...

在傳染病診斷領(lǐng)域，均相發(fā)光技術(shù)主要用于抗原或抗體的高靈敏檢測。例如，利用TR-FRET原理，可以設(shè)計檢測病毒抗原的均相免疫分析。將針對病毒抗原不同表位的兩種抗體分別標記供體和受體，樣本中若存在病毒抗原，則形成免疫復合物并產(chǎn)生FRET信號。該方法快速，可用于病原...

熱遷移分析（Cellular Thermal Shift Assay， CETSA）是一種研究靶點與藥物在細胞水平結(jié)合情況的技術(shù)。其原理是藥物結(jié)合會改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質(zhì)印跡法檢測，通量低。現(xiàn)在，通過與均相發(fā)光免疫檢測（如Alpha）...

傳統(tǒng)的血小板功能實驗室檢測（如流式、聚集儀）耗時且需要專業(yè)設(shè)備。開發(fā)基于膜糖蛋白即時檢測（Point-of-Care， POC）設(shè)備是重要方向。例如，已有嘗試使用微流體芯片，模擬血管剪切力，通過熒光標記抗體（如抗CD62P、PAC-1）實時監(jiān)測血小板在芯片內(nèi)的...

均相發(fā)光技術(shù)通過其“免分離”的關(guān)鍵設(shè)計理念，徹底變革了生物檢測的模式。從基礎(chǔ)的蛋白互作、酶活性分析，到復雜的細胞信號通路研究、高通量藥物篩選，再到臨床診斷和生物工藝監(jiān)控，其足跡已遍布生命科學和醫(yī)學的各個角落。以FRET、TR-FRET、Alpha、BRET等為...

研究細胞內(nèi)信號通路的動態(tài)變化，需要能在細胞裂解液甚至活細胞背景下進行快速、多通路的分析。均相化學發(fā)光技術(shù)完美契合這一需求。例如，使用基于Alpha或類似技術(shù)的磷酸化特異性免疫檢測，可以在同一塊板中，從細胞裂解液中直接定量多種信號蛋白（如Akt、ERK、STAT...

血小板膜糖蛋白的遺傳性缺陷或獲得性異常是多種出血性疾病的病因。 十分有名的是由CD42復合物（GP Ib-IX-V）基因突變引起的巨大血小板綜合征（Bernard-Soulier 綜合征），其特征是血小板減少、巨大血小板和出血傾向，源于血小板無法有效粘附于損傷...

GP Ib-IX-V不僅是粘附受體，也是高效的信號轉(zhuǎn)導復合體。當vWF結(jié)合或高剪切力作用時，GP Ibα胞內(nèi)段與多種信號蛋白相互作用，包括14-3-3ζ、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和Src家族激酶。這導致胞內(nèi)鈣離子動員、蛋白激酶C（PKC）活化、TXA2合...

編碼血小板膜糖蛋白的基因存在單核苷酸多態(tài)性（SNPs），可能輕微影響蛋白表達、結(jié)構(gòu)或功能，并與個體心血管疾病風險相關(guān)。研究十分普遍的是編碼GP IIIa（CD61）的ITGB3基因的PLa（HPA-1a/b）多態(tài)性。早期研究提示血小板等位基因可能與冠狀動脈疾病...

盡管血小板CD45的功能尚不完全清晰，但現(xiàn)有研究提示其可能作為一個重要的“調(diào)節(jié)器”。作為一種PTPase，CD45可通過去磷酸化作用，負調(diào)控Src家族激酶的活性。Src激酶參與多個血小板活化通路，包括GP VI/FeRγ鏈復合物（膠原受體）和CLEC-2受體（...

多色流式細胞術(shù)是分析血小板膜糖蛋白十分強大的工具之一。它可在全血環(huán)境中（十分小化體外活化）對單個血小板進行多參數(shù)分析，同時檢測靜息與活化標記。典型策略包括：以CD41或CD61作為泛血小板標記（設(shè)門），區(qū)分血小板群體;用PAC-1結(jié)合評估GP IIb/IIIa...

在重癥炎癥（如膿毒癥）、CAR-T診療或某些自身免疫病中，細胞因子風暴是危及生命的狀態(tài)，需要快速監(jiān)測多種炎癥因子。基于微球陣列的均相化學發(fā)光多重檢測技術(shù)，能夠從單份微量血清或血漿樣本中，同時定量檢測IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十幾種關(guān)鍵細胞因...

在臨床診斷和生物研究中，經(jīng)常需要同時檢測一個樣本中的多個指標。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實現(xiàn)多重分析。空間編碼：在不同的微孔或區(qū)域進行不同檢測。光譜編碼：使用發(fā)射不同波長熒光的多種受體（如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體），通過檢測不同波長通道的信號來區(qū)分不...

在臨床診斷和生物研究中，經(jīng)常需要同時檢測一個樣本中的多個指標。均相發(fā)光技術(shù)可以通過多種策略實現(xiàn)多重分析。空間編碼：在不同的微孔或區(qū)域進行不同檢測。光譜編碼：使用發(fā)射不同波長熒光的多種受體（如不同鑭系元素供體搭配不同顏色受體），通過檢測不同波長通道的信號來區(qū)分不...

患者反復輸注血小板后，可能因同種免疫產(chǎn)生針對供者血小板膜糖蛋白（主要是HPA和HLA抗原）的抗體，導致輸入的血小板被快速破壞，即PTR。流式細胞術(shù)是診斷PTR的重要工具。通過使用一組針對特定HPA（如HPA-1a， -1b， -2a， -2b， -3a， -3...

離子通道和轉(zhuǎn)運體是重要的藥物靶點，但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋白，為高通量篩選提供了可能。例如，使用對鈣離子敏感的水母發(fā)光蛋白（Aequorin）或基于熒光素酶的鈣指示劑（如Photina）。當離子通道開放引起離子內(nèi)流時，會觸發(fā)這些...

熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）是均相發(fā)光技術(shù)中應(yīng)用比較多方面的信號產(chǎn)生機制之一。其原理是：當一個熒光基團（供體，Donor）的發(fā)射光譜與另一個熒光基團或淬滅基團（受體，Acceptor）的吸收光譜有足夠重疊，且兩者距離非常接近（通常1-10納米）時，供體的激發(fā)態(tài)...

浦光生物的甲狀腺檢測套餐（TSH、FT4、FT3、TT4、TT3）的臨床應(yīng)用，建立在嚴密的邏輯解讀之上。優(yōu)先測定TSH。若TSH降低，下一步看FT4/FT3，升高則為原發(fā)性甲亢。若TSH升高，則看FT4，降低則為原發(fā)性甲減。若TSH正常或輕度異常，而FT4/F...

均相發(fā)光技術(shù)比較明顯的優(yōu)勢是其操作的極度簡便性所帶來的高通量檢測能力。由于摒棄了所有分離步驟，典型的均相發(fā)光檢測只需將樣本、識別元件（如抗體）和發(fā)光試劑依次加入微孔板中，混合孵育后即可直接讀數(shù)。這種“加樣-孵育-檢測”的模式，將復雜的多步流程簡化為一步或兩步，...

干細胞的多能性維持、定向分化及其功能評估，需要可靠的檢測方法。均相化學發(fā)光技術(shù)可用于：多能性標記物檢測：通過均相免疫分析定量細胞裂解物中OCT4、SOX2、NANOG等蛋白的水平。報告基因細胞系構(gòu)建：將多能性特異性或分化特異性啟動子與熒光素酶基因連接，通過檢測...

在藥物安全性評價早期，評估化合物的遺傳毒性至關(guān)重要。傳統(tǒng)的細菌回復突變試驗（Ames試驗）周期較長。一些基于哺乳動物細胞的均相化學發(fā)光遺傳毒性篩選方法被開發(fā)出來。例如，使用工程細胞系，其中DNA損傷響應(yīng)元件（如p53響應(yīng)元件）調(diào)控著熒光素酶報告基因的表達。當化...

CD45是一種跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPase），在所有有核造血細胞表面普遍表達，是淋巴細胞活化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子。 長期以來，血小板因其無核特性，CD45的表達與功能未受重視。 然而，現(xiàn)代高靈敏度檢測技術(shù)證實，人類血小板表面確實存在CD45的表達，盡管其密度遠...

盡管優(yōu)勢明顯，均相發(fā)光技術(shù)也存在一些挑戰(zhàn)和局限性。首先，某些技術(shù)（如FRET）可能受到樣本自身顏色（如血紅蛋白）、濁度或某些化合物（如具有強熒光或淬滅特性的藥物）的光學干擾。其次，均相檢測通常對試劑的特異性和純度要求極高，任何非特異性結(jié)合或聚集都可能導致假陽性...

離子通道和轉(zhuǎn)運體是重要的藥物靶點，但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋白，為高通量篩選提供了可能。例如，使用對鈣離子敏感的水母發(fā)光蛋白（Aequorin）或基于熒光素酶的鈣指示劑（如Photina）。當離子通道開放引起離子內(nèi)流時，會觸發(fā)這些...