細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方。Ham’s F-12營養混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）初用于CHO細胞的無血清培養。遼寧RPMI-1640細胞培養基供應商

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必要的一種營養，但其在溶液中不安定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發的降解。細胞運用其機制是：在細胞培訓時，細胞會日益向培養液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養方針相像，連續的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無須適應，并且可以延長細胞的培養時間，縮減傳代次數，即節約了時間也節省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培訓的細胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產非須要氨基酸的副作用，有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需。福建實驗細胞培養基生產產家即用型DMEM/F12，確保細胞活力與實驗結果可靠性。

    動物細胞培養（animalcellculture）就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。細胞培養基的種類有哪些？按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好，常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。2.神經元基礎培養基可為神經元生長提供基礎營養物質。IPL-41昆蟲培養基（IPL-41InsectMedium）旨在用于大規模擴增草地貪夜蛾（Spodopterafrugiperda）細胞系，也常用于通過桿狀病毒表達系統（BEVS）進行蛋白表達。IPL-41培養基是對原始IPL配方的改良，由美國農業部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發，用于大規模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎培養基中加入了胎牛血清和TPB培養基（TryptosePhosphateBroth），成功地實現了IPL-21AE。

    其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹。MEM（MinimalEssentialMedium）培養基MEM（MinimalEssentialMedium）培養基有含Earle's平衡鹽的類型，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓滅菌型的，也有過濾除菌型的；還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細胞培養基。DMEM細胞培養基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好，常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。IMDM細胞培養基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎上改良，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等。可用于雜交瘤細胞培養，以及無血清培養的基礎細胞培養基。RPMI-1640細胞培養基專門針對淋巴細胞培養設計，含有BSS、21種氨基酸、維生素等，適于多種正常細胞和腫瘤細胞的培養，也用做懸浮細胞培養。HamF12細胞培養基含微量元素。Dulbecco’s 改良培養基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。

    無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細胞貼壁生長，包括以下幾大類物質：1）促貼壁物質：一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2）促生長因子：針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些是許多細胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。RPMI RPMI 1640 培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。北京實驗細胞培養基批發

DMEM/F12培養基含有多種微量元素，廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養。遼寧RPMI-1640細胞培養基供應商

    可在血清含量低時用，適用于克隆化培養。F12適用于CHO細胞，也是無血清細胞培養基中常用的基礎細胞培養基。DMEM/F12細胞培養基將DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后營養成份豐富，血清使用量也減少。常作為開發無血清細胞培養基時的基礎細胞培養基。與天然培養基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代，因此，細胞培養中使用合成培養基時必須加入一定量的天然培養基成分，以克服合成培養基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清，這樣才能維持細胞活力，促進細胞增殖。針對不同的動物細胞，現已開發了多種商業化、個性化的低血清細胞培養基配方，營養成份更加豐富，血清使用量可降低至1～3%，由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養基（serumfreemedium，SFM）經歷了天然培養基、合成培養基后，無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。無血清培養基，一般是在合成培養基的基礎上，加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份，達到既能滿足動物細胞培養的要求，又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。遼寧RPMI-1640細胞培養基供應商

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