RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發出來的，RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基，1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基，采用碳酸氫鹽緩沖系統，與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基**初是為淋巴細胞培訓專門設計的，現在已普遍應用于各種正常細胞和惡性**的培養，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和惡性**，是采用極其普遍的培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比之下其他培養基之所以具與眾不同的功效，是因為其中富含還原劑谷胱甘肽和高濃度的維他命。RPMI1640培養基包含生物素、維他命B12以及PABA，這些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對普遍的細胞培養應用，我們提供多種組分的RPMI1640改進培養基。William’s E培養基主要用于大鼠肝上皮細胞的長期培養，也可用于其他哺乳動物的肝細胞培養。安徽實驗細胞培養基檢測

    Ham’sF-12營養混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）Ham’sF-12營養混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養混合物為基礎設計而成的，初用于CHO細胞的無血清培養。Ham’sF-12常作為無血清培養的基礎培養液，在低血清含量下時，特別適合單細胞培養和克隆化培養，添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養，如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。此外，Ham’sF-12與DMEM等體積混合后，得到的DMEM/F12培養基營養更為豐富，使用更為較廣。Ham’sF-12營養混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養元素，但其在溶液中不穩定，會自發降解，不含L-谷氨酰胺的培養基，可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 浙江實驗細胞培養基MEM α培養基是一種改良的MEM培養基，與MEM培養基相比MEM α培養基營養更為豐富。

    細胞培養基的種類很多，按其來源分為合成培養基和天然培養基（目前使用的培養基絕大部分是合成培養基），按其物質狀態分為干粉培養基和液體培養基兩類。干粉培養基需由實驗者自己配制并滅菌，液體培養基由專業商家提供，用戶可直接使用，非常方便。1、合成培養基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質：氨基酸氨基酸是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細胞自身不能合成，必須依靠培養液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。因此，各種培養液中都有較大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定，應置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養液內。已含谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2周以上時，還應重新加入原來量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是細胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖和醋酸等。無機鹽培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細胞調節細胞膜功能。

    培養液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養液中添加HEPES時需按以下方法調節鈉離子濃度。緩沖系統大多數細胞所需pH在-。但是，細胞培養適pH值隨培養的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數培養液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應與培養液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養箱空氣中CO2濃度設定在5％，培養液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養液中NaHCO3的加入量為。細胞培養瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養條件下，細胞培養瓶的蓋子應擰緊，以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養液呈橙黃色，堿性培養液呈深紅色。針對細胞培養應用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。

    1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富，培養效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。Ham’s F-12營養混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）是由Ham以Ham’s F-10營養混合物為基礎設計而成的。貴州華晨陽細胞培養基源頭直供

DMEM/F12：經典雙培養基配方，為各類細胞提供均衡營養與穩定生長環境。安徽實驗細胞培養基檢測

在細胞培養實踐中，選擇合適的 DMEM 培養基至關重要。對于生長較快、粘附性低的細胞，如某些腫瘤細胞和雜交瘤細胞，高糖型 DMEM 培養基是理想之選，其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細胞對能量的高需求，促進細胞快速生長。而對于一些原代細胞，因其對培養環境更為敏感，可能需要低糖型 DMEM 培養基，并根據細胞來源和特性添加特定的生長因子、營養補充劑等，定制專屬培養方案，為原代細胞提供**適宜的生長條件，提高原代細胞培養的成功率。安徽實驗細胞培養基檢測

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