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廣州外泌體示蹤

來源: 發布時間:2023-06-16

有研究表明外泌體通過喚醒瘤相關信號通路、誘導免疫耐受、重塑細胞外基質、增強瘤細胞侵襲性和調控瘤微環境促進瘤的發生和發展,外泌體在瘤的診斷上有諸多優勢:外泌體可保護其中的核酸類物質,防止其迅速降解;外泌體的形成與親源細胞的狀態密切相關;針對外泌體內容物的檢測比傳統的瘤標志物更具有特異性;外泌體寬泛存在于多種體液樣本中,以其為基礎的瘤診斷可在病情發展過程中及時監測分子標志物的變化,這種檢測更易監控且樣本更易收集。外泌體具有相似布朗運動的蛋白質聚集體,因此無法排除其他物質干擾。廣州外泌體示蹤

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人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而喚醒靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,從而喚醒細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。外泌體提取方法外泌體在心臟修復中起著關鍵作用。

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外泌體(Exosome)介導瘤細胞的增殖過程。瘤細胞通過與自身微環境的信息交流促進瘤細胞的增殖,而外泌體(Exosome)可以充當這種信息載體。當細胞中出現基因突變時,外泌體(Exosome)會通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細胞,從而導致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達,使瘤細胞獲得增殖特性。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細胞,促進瘤細胞逃避免疫監視,為瘤細胞在體內生長創造條件。然而,雖然當前外泌體生物學仍然不成熟,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎研究進展和臨床轉化。

外泌體(Exosome)是一種直徑為30-100nm的納米級脂質包裹體結構,內部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質。外泌體由細胞分泌釋放出來,在血液等體液內傳播,較后又可被其他細胞吞噬,是細胞間通訊的重要介質。源自于間充質干細胞內分泌的外泌體,富含一百多種胞外基質蛋白,mRNA信使核糖核酸和多重生長因子。在臨床上,干細胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍,再生健康皮膚;在護膚方面,主要是對外傷受損、衰老中毒皮膚進行修復,比較全的調理皮膚、改善膚質,令肌膚恢復年輕、健康的狀態。干細胞外泌體有減少細胞凋亡、促進血管生成、抑制纖維化等重要生物學功能,在調控組織再生方面有好的前景。

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利用蛋白質免疫印跡和酶聯免疫吸附分析技術可以對外泌體標志性蛋白質進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經典表征手段之一,操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等,內參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脫氫酶,陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB,線粒體標志蛋白)或鈣聯結蛋白Calnexin。在酶聯免疫吸附析法中,外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質,隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題,相比較而言,酶聯免疫吸附分析法比蛋白質免疫印跡法更加快速,適用于高通量分析。外泌體具有異質性,即使是同一種細胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區別。外泌體染料

NTA技術已被作為外泌體表征手段之一。廣州外泌體示蹤

細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段:(1)質膜內陷,形成早期內吞小泡;(2)內吞小泡向內萌發成熟,形成多囊泡體;(3)多囊泡體與質膜融合,并釋放出囊泡內容物,形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質,其密度為1.13~1.19g/mL,由平均厚度小于5nm的雙層脂膜所包裹,具有典型杯狀形態,呈現為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈,其質膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經酰胺和鞘磷脂構成,另有與細胞來源相關的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質、核酸和脂質等生物活性大分子,其中主要為蛋白質,且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有,只有小部分與其來源有關,為其分泌細胞的特有蛋白,能夠反映分泌細胞的類型和生理病理狀態。除此之外,外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸,并將其運輸到靶細胞,發揮相應的生物學功能。廣州外泌體示蹤

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