免疫印跡或蛋白質印跡是分析外泌體較常用的方法之一，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結合。首先對樣品進行處理將囊泡裂解并將蛋白質變性，變性后，通過SDS-PAGE分離蛋白質，然后將其轉移到硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上并暴露于針對目的抗原的抗體中?？贵w特異性識別膜表面上的抗原，然后將膜暴露于第二抗體中。通過二抗的熒光標簽或與二抗偶聯的辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶基團進行檢測。常用的標記蛋白為CD63、CD81、TSG101和ALIX等。但是此方法的特異性和重復性會受到所用抗體質量的限制。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。血清外泌體tmt

外泌體含有的信號分子能反映分泌細胞的生理狀態和功能狀態,甚至還會包含細胞病態相關的分子信息,從而提供了豐富的潛在的生物標志物分子源。瘤細胞分泌的外泌體通過對大分子物質的轉移和傳遞調節臨近或遠處瘤生長的微環境,對促瘤生成及瘤增生、轉移發揮著不同的調節作用。瘤細胞分泌的外泌體還可以通過誘導耐藥和免疫抑制來促進瘤的發展。外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長時間,這些特點使得外泌體可應用于瘤的早期診斷和預后判斷。靶向瘤的外泌體的標志物可能為瘤疾病的診斷和治理提供新的指標和途徑,對高危人群早期診斷和早期治理以降低或減緩瘤病例的發生上發揮著重要的作用。北京外泌體WB利用外泌體自身的物理化學性質所研發的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果。

目前，在各種健康與疾病模型中都發現，外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外，它們還有潛力被用于臨床，作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會將含有不同RNA和蛋白質成分的外泌體釋放到體液循環中，因其特殊性，外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測。例如，從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預后的指標。

雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩定性和內在靶向性等潛在優勢，但是外泌體在藥物遞送中的應用研究才剛剛起步，尚有許多問題需解決：選擇何種細胞作為外泌體的供體：如DCs來源的外泌體可用于免疫治理，因其富含組織相容復合物（MHC）及T細胞共刺激分子，能在體內喚醒T淋巴細胞，進而抑制瘤細胞增殖；骨髓來源的間充質干細胞（MSCs）來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用；γδT細胞、自然殺傷細胞（NK）、瘤細胞等均有研究報道可作為載藥級別外泌體的細胞來源。外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。

外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結構,其穩定性較好,可保護內部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前,常用的儲存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會導致外泌體形狀與物理性質的改變,也可能導致多層囊泡的形成和聚集,反復凍融會導致外泌體表面分子的生物特性、含量和標志物組成發生變化。血清中包含外泌體在內的細胞外囊泡DNA在不同儲存環境可保持穩定,血漿存放于4°C時其RNA會明顯降解,在–20°C下長期保存也會導致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標志物的潛力。外泌體的提取分離方法：PEG-base沉淀法。血漿外泌體熒光標記

近些年關于外泌體研究很普遍。血清外泌體tmt

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環系統，參與妊娠期間母胎界面的免疫調節、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調控，在正常妊娠過程維持中發揮重要作用。而很多妊娠并發癥，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關疾病的發生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經典方法，該方法是根據外泌體的沉降系數差速離心將其分離出來，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體，如樹突狀細胞、淋巴細胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。血清外泌體tmt

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